纖維素崩解實驗濾紙不潰爛？
2016-09-02技術(shù)資料
我做了濾紙潰爛實驗的那些菌長了，而且菌液很濃但是濾紙還是完好，有的菌是附著在濾紙上的，我用的培養(yǎng)基是蛋白胨5g/L，濾紙，水，pH7.0左右，考慮是不是我再用胨水做個空白，看接進(jìn)去后該菌是否生長？還有我是不會是可以在立體顯微鏡下看空白和較濃菌液中的濾紙有無變化，還有在搖床上空白對照中有纖維素絲，但菌液已看不出有纖維絲了，能否說明能夠利用濾紙了呢？蛋白胨成分不明確的話，我用尿素代替蛋白胨可以嗎？
測下有沒有纖維素酶酶活。。。
蛋白胨本身就是一種碳源，在你的培養(yǎng)基中濾紙不是單一碳源，所以應(yīng)該修改你的培養(yǎng)基，Zui好用無機(jī)碳源
說錯了，是無機(jī)氮源
我改成硫酸銨試試
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液：葡萄糖在108℃烘箱內(nèi)烘干30min~1h后，配置1.037g/ml濃度葡萄糖溶液，再分別取0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml葡萄糖溶液用蒸餾水稀釋至2ml，加入3mlDNS試劑沸水浴10min,立即用冷水終止反應(yīng)，另用0ml，在波長為540nm下測定光吸收值(OD值)，光吸收值作為縱坐標(biāo)，以葡萄糖含量作為橫坐標(biāo)，繪制出葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線及曲線方程式。
酶活力按國際單位的定義是：每min催化水解生成1μmol葡萄糖的酶量為一個酶活力單位IU。
2.2.2.2 濾紙酶活的測定
DNS法：
取1ml菌液在6000r的離心機(jī)中離心10min，棄去沉淀，加入CMC底物溶液。 在50℃恒溫水浴鍋中反應(yīng)30min。反應(yīng)后加入3mlDNS溶液，放于沸水浴中煮沸10min，用冷水立即終止反應(yīng)。在波長為540nm下測定光吸收值(OD值)。根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線測算濾紙酶的活性。對照為菌液沸水10min，立即冷水冷卻。每個樣做三個平行。
微精纖維素酶活的測定
取1ml菌液在6000r的離心機(jī)中離心10min，棄去沉淀，加入微精纖維素底物溶液。 在50℃恒溫水浴鍋中反應(yīng)2h。反應(yīng)后加入3mlDNS溶液，放于沸水浴中煮沸10min，用冷水立即終止反應(yīng)。在波長為540nm下測定光吸收值(OD值)。根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線測算濾紙酶的活性。對照為菌液沸水10min，立即冷水冷卻。每個樣做三個平行。
你的1.037g/ml的單位對嗎？還有你是加完DNS為什么沸水浴10min,我看的文獻(xiàn)多是5min，還有沸水浴冷卻后你是直接測定的嗎？沒有再稀釋了嗎？
我在測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的時候遇到些問題