霉菌在發(fā)酵罐中轉(zhuǎn)速能不能提高？
大家好！我是剛從做搖瓶轉(zhuǎn)向上罐的，遇到問題了想請教下大家：
Zui近做土曲霉上罐（7L玻璃罐）發(fā)酵生產(chǎn)有機(jī)酸時(shí)，80%對應(yīng)文獻(xiàn)轉(zhuǎn)速設(shè)置的是100-150rpm，只有很少幾篇文獻(xiàn)出現(xiàn)300-400rpm的，Zui高的400rpm。
按照大部分文獻(xiàn)的做法，我設(shè)置轉(zhuǎn)速125rpm，通氣量我開到Zui大（近4vvm，別人基本都才0.2-0.5VVm），70h以前ＤＯ都只能顯示為0～5，可能是溶氧不足導(dǎo)致我的目標(biāo)產(chǎn)物就產(chǎn)量不足搖瓶１／６。
后來我逐漸升高轉(zhuǎn)速，發(fā)現(xiàn)調(diào)到550rpm，通氣量開到Zui大，才能使溶氧DO是高于30～45。
但是文獻(xiàn)說霉菌轉(zhuǎn)速太高，機(jī)械剪切力太大，對霉菌形態(tài)有影響。
所以我想問問大家
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（1）有人做霉菌遇到過跟文獻(xiàn)這么不相符合的情況嗎（90%都是外文文獻(xiàn)，有篇文獻(xiàn)是150rpm，0.5vvm，泡沫太多無法控制，中途停止）？
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（2）是不是轉(zhuǎn)速不應(yīng)該向我這樣開這么高，對菌的損害很大？我是70h后開大的，產(chǎn)率是明顯提高了，我擔(dān)心的是0h就開始轉(zhuǎn)速這么高的話，是不是很快菌就受不了，死掉了:(。。。
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70h后提高轉(zhuǎn)速，提高產(chǎn)率也可能是由于菌絲體死亡，代謝產(chǎn)物釋放的原因吧！
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有可能的，因?yàn)楫a(chǎn)慮高維持一個(gè)小時(shí)后，在同樣的條件下，就沒有出現(xiàn)同樣的效果了?？墒窃撛趺雌胶饽?？DO低了不產(chǎn)，轉(zhuǎn)速高DO高了菌死了。。。
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樓主的發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速不能和DO偶聯(lián)么？按道理說7L的發(fā)酵罐三四百轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速算比較正常了，雖然真菌的菌絲和發(fā)酵液表觀粘度與攪拌關(guān)系很大，但攪拌的多少與發(fā)酵罐的大小也有關(guān)系。比如7L罐的攪拌500左右的話，50L罐估計(jì)400就可以，500L估計(jì)250轉(zhuǎn)，5t的150就可以。所以樓主或許應(yīng)該看看文獻(xiàn)所用發(fā)酵罐的規(guī)模，還有就是也別太相信文獻(xiàn)。雖然真菌的菌絲粗而常，且菌絲形態(tài)受攪拌影響很大，但也不用過于擔(dān)心攪拌剪切會(huì)把的菌絲弄死，頂多也就是影響形態(tài)而已。
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不知道你做的土曲霉發(fā)酵控制的DO是多少，我做過毛霉的發(fā)酵，是生產(chǎn)酶的，要求DO≥40％，轉(zhuǎn)速、風(fēng)量、罐壓都是影響DO的關(guān)鍵因素，在長菌期轉(zhuǎn)速不能太高，一般控制在400rpm以下，起始通風(fēng)比為1：0.3左右，罐壓在0.05～0.08Mpa，校正DO值為100％，當(dāng)孢子萌發(fā)長出大量的菌絲后，耗氧量增大，DO下降低于40％時(shí)可以通過提高轉(zhuǎn)速、風(fēng)量使DO≥40％，Zui高轉(zhuǎn)速可以達(dá)到700～800rpm，在提高轉(zhuǎn)速后過幾小時(shí)要取樣鏡檢，觀察菌絲是否有斷裂的，如果有量比較多時(shí)要降低轉(zhuǎn)速。當(dāng)轉(zhuǎn)速、風(fēng)量都提到Zui大量，如果DO還是低于40％，可以適當(dāng)提高罐壓到0.1～0.12Mpa，但不知你的發(fā)酵罐承壓情況怎么樣。另外發(fā)酵液的粘度也會(huì)影響DO，如果發(fā)酵中后期所有的條件都達(dá)到極限了可以考慮補(bǔ)一些無菌水，降低發(fā)酵液的粘度也會(huì)增加發(fā)酵液的DO。還是要靠自己摸索。
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絲狀菌轉(zhuǎn)速肯定不能過高，泡沫多，你加消泡劑了么？
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樓主如果擔(dān)心DO不足，可以適當(dāng)增加罐壓，一般Zui高可到0.05mPa，但不是罐壓也不要太高，太高的罐壓不利于CO2的排出。還有一個(gè)備選的方案是改變槳葉的類型或者增大槳葉尺寸增大發(fā)酵罐中槳葉的徑高比，也可有效的加大DO。
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我的情況還沒完全描述清楚：
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（1）我的發(fā)酵罐是美國產(chǎn)的7L玻璃罐，沒有罐壓這個(gè)參數(shù)。
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（2）我的DO是變動(dòng)的，文獻(xiàn)上也沒有說要控制多少，剛接入幾個(gè)小時(shí)內(nèi)DO可以到達(dá)90以上，后來慢慢降低，接入12h左右DO降低至10左右，但是就產(chǎn)酸情況來看，10左右產(chǎn)酸不算慢，12h時(shí)轉(zhuǎn)速升至470rpm，通氣量升至2vvm，這樣大致是DO維持在10左右。但通氣量和轉(zhuǎn)速的升高導(dǎo)致大量起泡（培養(yǎng)基含
工業(yè)上殘余的玉米漿），手動(dòng)加入幾滴硅油。這時(shí)問題又來了，加入2-3滴硅油后，泡立馬沒有，DO也立馬降低至5左右；這樣維持時(shí)間不到半個(gè)小時(shí)就又要加入消泡劑，如此循環(huán)，DO剛升上去（不到10）就隨消泡劑的加入又降下來。1-2天后消泡劑積累總量過大，轉(zhuǎn)速提升至500rpm，通氣量近4vvm，DOZui大也就到5，很難再生上去。
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（3）通氣量增大，轉(zhuǎn)速高后水分揮發(fā)厲害，12h揮發(fā)約500ml，我的裝液量是4L，后來就是像你說的那樣，往發(fā)酵罐中流加無菌水維持體積在3.5L左右。
再次謝謝你！打擾了。
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謝謝你的回復(fù)，可是首先我們學(xué)校購買的罐只能是這樣的，沒有改變槳葉類型等的選擇；其次，這種罐只有通氣量和轉(zhuǎn)速、溫度、pH的設(shè)置參數(shù)，沒有罐壓的設(shè)置。。。
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1.不知道你的發(fā)酵罐是否是美國NBS的，如果是的話罐壓控制在0.05Mpa是沒問題的，我以前用過NBS Bioflor110 14L的發(fā)酵罐，整個(gè)罐體全是玻璃的，Zui大的壓力達(dá)到過0.08～0.1Mpa，可以在尾氣排放管處加一個(gè)可以安壓力表的三通，用硅膠管連接即可，在壓力表后安硅膠管，用止血夾來調(diào)節(jié)壓力，而且有一定的罐壓可以有效的控制泡沫的產(chǎn)生，可以減少消泡劑的用量。
2.不知道你的消泡劑是怎么用的，Zui好不要用濃的消泡劑，一般配制2～10％的濃度滅菌后使用，濃度高的消泡劑有時(shí)消泡效果反而不好，如果泡沫不是很多，沒有出現(xiàn)逃液的情況可以盡量少加消泡劑，消泡劑加的多也會(huì)影響發(fā)酵液中的溶解氧。
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