細(xì)胞產(chǎn)生凋亡時(shí),染色質(zhì)會(huì)固縮。Hoechst 33342可以穿透細(xì)胞膜,染色后凋亡細(xì)胞熒光會(huì)比正常細(xì)胞顯明加強(qiáng)。碘化丙啶(PI)不能穿透細(xì)胞膜,對(duì)于具有完全細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色。而對(duì)于壞逝世細(xì)胞,其細(xì)胞膜的完全性損失,碘化丙啶(PI)可以染色壞逝世細(xì)胞。上述兩種染料雙染后,應(yīng)用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測時(shí),顯微鏡價(jià)格支架價(jià)格,正常細(xì)胞為弱紅色熒光+弱藍(lán)色熒光,凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光,壞逝世細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光。參考下圖,左圖為引誘凋亡前的正常細(xì)胞,右圖為引誘凋亡后的細(xì)胞。
染色快速便利,兩種染料的染色僅需20-30分鐘,一步染色即可完成。
注意事項(xiàng):
需應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行紅色和藍(lán)色雙熒光檢測。也可應(yīng)用熒光顯微鏡檢測。
染色后宜盡快檢測。
Hoechst 33342對(duì)人體有害,碘化丙啶(PI)對(duì)人體有刺激性,請(qǐng)注意恰當(dāng)防護(hù)。
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