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　　實驗二活性污泥的觀察

　　試驗項目性質(zhì)：基本驗證試驗

　　所屬課程名稱：《水處理微生物學(xué)試驗》

　　實驗打算學(xué)時：2 學(xué)時

　　一、實驗?zāi)繕?biāo)

　　1. 通過顯微鏡直接視察活性污泥菌膠團和原活潑物，學(xué)會識別活性污泥中的菌膠團及生物相。

　　2. 學(xué)習(xí)應(yīng)用壓滴法制造標(biāo)本片。

　　3. 依據(jù)菌膠團的形態(tài)、結(jié)構(gòu)，判別污泥的性狀。

　　二、實驗原理

　　活性污泥是活性污泥法處理體系中的主體作用物資，在廢水生物處置中，不論采取何種方式處理構(gòu)筑

　　物及何種工藝流程，都是通過處置體系中活性污泥的新陳代謝作用，使活性污泥具有將有機污染物轉(zhuǎn)化為

　　穩(wěn)固無機物的活氣，在有氧條件下，將廢水中的有機物氧化分解為無機物，從而到達廢水凈化的目標(biāo)；活

　　性污泥法處理廢水的后果與活性污泥中微生物的種類、數(shù)目及其活性有關(guān)。

　　活性污泥是指：由細菌、菌膠團、原生動物、后生動物等微生物群體及吸附的污水中有機和無機物資

　　組成的、有必定活氣的和具有良好凈化污水功效的絮絨狀污泥。

　　活性污泥中除了含有活性微生物外，還挾帶著來自污水的有機物、無機懸浮物、膠體物；活性污泥中

　　棲息的微生物以好氧微生物為主，是一個以細菌為主體的群體，除細菌外，還有酵母菌、放線菌、霉菌以

　　及原生動物和后生動物。

　　活性污泥中細菌含量一般在 107-108 個/mL，原生動物103 個/mL，原生動物中以纖毛蟲居多數(shù)，固著

　　型纖毛蟲可作為唆使微生物，固著型纖毛蟲如鐘蟲、累枝蟲、蓋纖蟲、獨縮蟲等呈現(xiàn)且數(shù)目Zui多時，闡明

　　活性污泥培育成熟且活性良好。在處置生涯污水的活性污泥中存在大批的原生動物和部分微型后生動物，

　　通過分辨認定其種屬，據(jù)此可以班別處理水質(zhì)的優(yōu)劣，因此可將微型動物稱為活性污泥體系中的唆使生物。

　　三、實驗器材

　　1．儀器和其他物品

　　普通光學(xué)顯微鏡，載玻片，蓋玻片。

　　2．微生物資料（活性污泥）

　　四、操作步驟

　　1. 壓片標(biāo)本的制備

　?。?）取活性污泥曝氣池混雜液一小滴，放在干凈的載玻片中心（如混雜液中活性污泥較少可待其沉

　　淀后，取沉淀的活性污泥一小滴加至載玻片上，如混雜液中活性污泥較多，則應(yīng)稀釋落后行觀察）。

　?。?）蓋上蓋玻片，即制成活性污泥壓片標(biāo)本。在加蓋玻片時，要先使蓋玻片的一邊接觸水滴，然后

　　輕輕放下，否則易形成氣泡，影響觀察。

　　2. 顯微鏡察看

　?。?）觀察前的籌備

　?、?顯微鏡的安頓：置顯微鏡于平整的實驗臺上，鏡座距實驗臺邊沿約3-4cm 。鏡檢時姿態(tài)要端

　　正。取放顯微鏡時應(yīng)一手握住鏡臂，一手托住底座，使顯微鏡堅持豎立、安穩(wěn)。切忌用單手拎提；

　　且不論使用單筒顯微鏡或雙筒顯微鏡均應(yīng)雙眼同時睜開觀察，以減少眼睛疲勞，也便于邊觀察邊繪圖

　　或記載。

　　② 光源調(diào)節(jié)：安裝在鏡座內(nèi)的光源燈可通過調(diào)節(jié)電壓以獲得恰當(dāng)?shù)恼彰髁炼?，而使用反光鏡采

　　集自然光或燈光作為照明光源時，應(yīng)依據(jù)光源的強度及所用物鏡的放大倍數(shù)選用凹面或凸面反光鏡并

　　調(diào)節(jié)其角度，使視野內(nèi)的光線均勻，亮度合適。

　?、?依據(jù)使用者的個人情形，調(diào)節(jié)單(雙)筒顯微鏡的目鏡，顯微鏡的目鏡間距可以恰當(dāng)調(diào)節(jié)，而左

　　目鏡上一般還配有曲光度調(diào)節(jié)環(huán)，可以適應(yīng)眼距不同或兩眼視力有差別的不同觀察者。

　?、?聚光器數(shù)值孔徑值的調(diào)節(jié)：調(diào)節(jié)聚光器虹彩光圈值與物鏡的數(shù)值孔徑值相符或略低。有些顯

　　微鏡的聚光器只標(biāo)有Zui大數(shù)值孔徑值，而沒有具體的光圈數(shù)刻度。使用這種顯微鏡時可在樣品聚焦后

　　取下一目鏡，從鏡筒中一邊看著視野，一邊縮放光圈，調(diào)劑光圈的邊緣與物鏡邊沿黑圈相切或略小于

　　其邊沿。由于各物鏡的數(shù)值孔徑值不同，所以每轉(zhuǎn)換一次物鏡都應(yīng)進行這種調(diào)節(jié)。在聚光器的數(shù)值孔

　　徑值斷定后，若需轉(zhuǎn)變光照強度，可通過升降聚光器或轉(zhuǎn)變光源的亮度來實現(xiàn)，原則上不應(yīng)再通過虹

　　彩光圈調(diào)節(jié)。當(dāng)然，有關(guān)虹彩光圈、聚光器高度及照明光源強度的使用原則也不是固定不變的，只要

　　能獲得良好的觀察后果，有時也可根據(jù)不同的具體情況機動應(yīng)用，不必定拘泥不變。

　　2. 顯微觀察

　?。?）低倍鏡視察：

　　將玻片置于載物臺上，用標(biāo)本夾夾住，移動推動器使觀察對象處在物鏡的正下方。降落 10×物鏡，使

　　其接近標(biāo)本，用粗調(diào)節(jié)器慢慢升起鏡筒，使標(biāo)本在視野中初步聚焦，再使用細調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)至圖像清楚。通

　　過玻片夾推動器慢慢移動玻片，認真觀察標(biāo)本各部位，找到適合的目標(biāo)物，細心觀察并記載所觀察到的結(jié)

　　果。

　　在任何時候使用粗調(diào)節(jié)器聚焦物像時，必須養(yǎng)成先從側(cè)面凝視警惕調(diào)節(jié)物鏡靠近標(biāo)本，然后用目鏡觀

　　察，慢慢調(diào)節(jié)物鏡分開標(biāo)本進行準(zhǔn)焦的習(xí)慣，以免因一時的誤操作而破壞鏡頭及玻片。

　?。?）高倍鏡觀察：

　　低倍鏡下找到適合的觀察目的并將其移至視野中心后，輕輕轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器將高倍鏡移至工作地位。

　　對聚光器光圈及視野亮度進行恰當(dāng)調(diào)節(jié)后微調(diào)細調(diào)節(jié)器使物像清楚，應(yīng)用推動器移動標(biāo)本細心觀察并記載

　　所觀察到的成果。

　　在一般情況下，當(dāng)物像在一種物鏡中已清晰聚焦后，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器將其他物鏡轉(zhuǎn)到工作地位進行觀

　　察時，物像將堅持基礎(chǔ)準(zhǔn)焦的狀況，這種現(xiàn)象稱為物鏡的同焦 (parfocal)。應(yīng)用這種同焦現(xiàn)象，可以保證

　　在應(yīng)用高倍鏡或油鏡等放大倍數(shù)高、工作間隔短的物鏡時僅用細調(diào)節(jié)器即可對物像清楚聚焦，從而避免由

　　于應(yīng)用粗調(diào)節(jié)器時可能的誤操作而破壞鏡頭或載玻片。

　　3.顯微觀察請求

　　（1）低倍鏡觀察請求

　　察看生物相的全貌，要注意污泥絮粒的大小，污泥構(gòu)造的松緊水平，菌膠團和絲狀菌的比例及其生長

　　狀態(tài)，并加以記載和做出必要的描寫。觀察微型動物的種類、運動狀態(tài)，對重要種類進行計數(shù)。

　?。?）高倍鏡觀察

　　用高倍鏡觀察，進一步看清微型動物的結(jié)構(gòu)特點，觀察時注意微型動物的外形和內(nèi)部構(gòu)造（例如鐘蟲

　　體內(nèi)是否存在食品胞，纖毛環(huán)的擺動情形等）。

　　觀察菌膠團時，應(yīng)注意膠質(zhì)的厚薄和色澤，新生菌膠團呈現(xiàn)的比例。

　　視察絲狀菌時，注意菌體內(nèi)是否有類脂物資和硫粒積聚，以及絲狀菌生長，絲體內(nèi)細胞的排列，形態(tài)

　　和活動特點，以便斷定絲狀菌的種類，并進行記載。

　　4. 顯微鏡用畢后的處理

　?。?） 上升鏡筒，取下載玻片。

　?。?）用擦鏡紙干凈其他物鏡及目鏡；用綢布干凈顯微鏡的金屬部件。

　?。?）將各部分還原，反光鏡垂直于鏡座，將物鏡轉(zhuǎn)成“八”字形，再向下旋。同時把聚光鏡降下，以免

　　接物鏡與聚光鏡產(chǎn)生碰撞危險。

　　5. 活性污泥中典范微生物的形態(tài)特點

　　五、實驗報告

　　1. 記載觀察所取污泥的外形、結(jié)構(gòu)、有無絲狀菌、原生動物的情形。

　　2. 繪制所察看原活潑物和微型后活潑物的形態(tài)圖

　　3. 根據(jù)實驗觀察情況，試對污水廠活性污泥質(zhì)量及運行情況作初步評價。

　　六、思考題

　　1．自然水體中生物帶是如何劃分的？

　　2. 活性污泥中原生動物和微型后生動物的知識作用有哪些？（種類、生涯環(huán)境及唆使作用）

　　附：微生物形態(tài)構(gòu)造圖


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