2.試管法
?。?)標(biāo)志試管:取小試管2支,分辨標(biāo)記抗A、抗B。
(2)加尺度抗血清:分辨滴加抗A、抗B尺度血清各1滴于相應(yīng)標(biāo)志的試管中。
(3)加紅細胞懸液:分辨滴加被檢者5% 紅細胞生理鹽水懸液l滴于各試管中,混勻。
(4)離心:以1 000 r/min離心1 min。
(5)察看成果:取出試管,先觀察上層液有無溶血現(xiàn)象,再將試管輕輕動搖使沉于管底的紅細胞浮起,肉眼視察有無凝集及凝集強度。
①完整凝聚:上層液體清亮、無色,底部有紅細胞凝塊,
USB顯微鏡,管內(nèi)情胞呈花邊狀,用手指輕彈試管,紅細胞上升,隨即成為均勻的懸液。
?、谀瘡姸扰袛啵簶?biāo)準(zhǔn)同玻片法。如稍微凝集或不見凝集,必需將反應(yīng)物倒于玻片上,再以低倍鏡觀察。
?。?)判定血型結(jié)果:按表4-2、圖4-3所列的標(biāo)準(zhǔn)判斷。
?。?)報告方法: 正定血型(試管法)X型。
(8)操作示看法圖4-5。圖4-5ABO血型鑒定正定型試管法操作示意圖
【注意事項】
1.器材所用器材必需干燥干凈、防止溶血;為避免交叉污染,試管、尖滴管均一次性應(yīng)用。
2.試劑分型血清質(zhì)量性能應(yīng)符合及格試劑的請求。
3.標(biāo)本被檢紅細胞標(biāo)本新穎,無細菌污染。
4.標(biāo)記玻片及試管均應(yīng)嚴厲標(biāo)記。
5.加尺度抗血清
6.紅細胞懸液紅細胞懸液濃渡過高或過低,抗原抗體比例不恰當(dāng),使反響不顯明,輕易誤判為陰性反應(yīng)。
7.離心離心時光和速度應(yīng)正確,以防止涌現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果。
8.察看凝集
?。?)玻片法定型時,轉(zhuǎn)動玻片動作要輕。注意防止懸液干枯,以免將玻片邊沿干枯引起的紅細胞凝集誤以為抗原抗體反響凝集。
(2)理論上IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細胞的反映溫度以4℃Zui強,但為了防止冷凝聚現(xiàn)象的干擾,一般仍在室溫(20°C~24°C)內(nèi)進行實驗,37°C可使反響削弱。
(3)玻片法反應(yīng)時光不能少于10 min,否則較弱凝集不能呈現(xiàn),造成假陰性。
?。?)察看結(jié)果時應(yīng)注意紅細胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝集以及緡錢狀形成的差別。明白溶血的產(chǎn)生提醒存在抗原抗體反映,意義同凝集。9.?dāng)喽ǔ晒R妴栴}見表4-3。
10.報告結(jié)果 標(biāo)記、操作、結(jié)果判斷、結(jié)果記載與報告應(yīng)嚴厲核對,避免筆誤。
11.正反定型結(jié)果不一致的解決措施見反定型法。12.玻片法與試管法比擬見表4-4。
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