顯微鏡,顯微鏡價(jià)格,顯微鏡的價(jià)格

顯微鏡的基礎(chǔ)光學(xué)原理（一） 折射和折射率 光線在均勻的各向同性介質(zhì)中，兩點(diǎn)之間以直線傳布，當(dāng)通過(guò)不同密度介質(zhì)的透明物體時(shí)，則產(chǎn)生折射現(xiàn)象，這是由于光在不同介質(zhì)的流傳速度不同造成的。當(dāng)與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體(如玻璃)時(shí)，光線在其介面改變了方向，并和法線構(gòu)成折射角。（二） 透鏡的性能 透鏡是組成顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的Zui根本的光學(xué)元件，物鏡目鏡及聚光鏡等部件均由單個(gè)和多個(gè)透鏡組成。依其外形的不同，可分為凸透鏡(正透鏡)和凹透鏡(負(fù)透鏡)兩大類(lèi)。 當(dāng)一束平行于光軸的光線通過(guò)凸透鏡后相交于一點(diǎn)，這個(gè)點(diǎn)稱(chēng)"焦點(diǎn)"，通過(guò)交點(diǎn)并垂直光軸的平面，稱(chēng)"焦平面"。焦點(diǎn)有兩個(gè)，在物方空間的焦點(diǎn)，稱(chēng)"物方焦點(diǎn)"，該處的焦平面，稱(chēng)"物方焦平面"；反之，在象方空間的焦點(diǎn)，稱(chēng)"象方焦點(diǎn)"，該處的焦平面，稱(chēng)"象方焦平面"。 光線通過(guò)凹透鏡后，成正立虛像，而凸透鏡則成正立實(shí)像。實(shí)像可在屏幕上浮現(xiàn)出來(lái)，而虛像不能。（三） 凸透鏡的五種成象規(guī)律 1. 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以外時(shí)，則在象方二倍焦距以?xún)?nèi)、焦點(diǎn)以外形成縮小的倒立實(shí)象； 2. 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距上時(shí)，則在象方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)象； 3. 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以?xún)?nèi)，焦點(diǎn)以外時(shí)，則在象方二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)象； 4. 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)上時(shí)，則象方不能成象； 5. 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)以?xún)?nèi)時(shí)，則象方也無(wú)象的形成，而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的地位形成放大的豎立虛象。 三、 光學(xué)顯微鏡的成象（幾何成象）原理 只有當(dāng)物體對(duì)人眼的張角不小于某一值時(shí)，肉眼能力差別其各個(gè)細(xì)部，該量稱(chēng)為目視分辨率ε。在Zui佳條件下，即物體的照度為50~70lx及其比較度較大時(shí)，可達(dá)到1'。為易于觀測(cè)，一般將該量加大到2'，并取此為均勻目鏡分辨率。 物體視角的大小與該物體的長(zhǎng)度尺寸和物體至眼睛的間隔有關(guān)。有公式y(tǒng)=Lε 距離L不能取得很小，由于眼睛的調(diào)節(jié)才能有必定限度，尤其是眼睛在接近調(diào)節(jié)才能的極限范圍工作時(shí)，會(huì)使視力極度疲勞。對(duì)于尺度(正視)而言，Zui佳的視距規(guī)定為250mm(明視距離)。這意味著，在沒(méi)有儀器的條件下，目視分辯率ε=2'的眼睛，能明白地域分大小為0.15mm的物體細(xì)節(jié)。 在觀測(cè)視角小于1'的物體時(shí)，必需使用放大儀器。放大鏡和顯微鏡是用于觀測(cè)放置在觀測(cè)職員近處應(yīng)予放大的物體的。 （一） 放大鏡的成像原理 表面為曲面的玻璃或其他透明資料制成的光學(xué)透鏡可以使物體放大成像，光路圖如圖1所示。位于物方焦點(diǎn)F以?xún)?nèi)的物AB，其大小為y，它被放大鏡成一大小為y'的虛像A'B'。放大鏡的放大率 Γ=250/f' 式中250--明視距離，單位為mm f'--放大鏡焦距，單位為mm 該放大率是指在250mm的距離內(nèi)用放大鏡觀察到的物體像的視角同沒(méi)有放大鏡觀察到的物體視角的比值。 （二） 顯微鏡的成像原理 顯微鏡和放大鏡起著同樣的作用，就是把近處的渺小物體成一放大的像，以供人眼觀察。只是顯微鏡比放大鏡可以具有更高的放大率而已。 圖2是物體被顯微鏡成像的原理圖。圖中為便利計(jì)，把物鏡L1和目鏡L2均以單塊透鏡表現(xiàn)。物體AB位于物鏡前方，分開(kāi)物鏡的距離大于物鏡的焦距，但小于兩倍物鏡焦距。所以，它經(jīng)物鏡以后，必定形成一個(gè)倒立的放大的實(shí)像A'B'。 A'B'位于目鏡的物方焦點(diǎn)F2上，或者在很靠近F2的地位上。再經(jīng)目鏡放大為虛像A''B''后供眼睛觀察。虛像A''B''的位置取決于F2和A'B'之間的距離，可以在無(wú)窮遠(yuǎn)處（當(dāng)A'B'位于F2上時(shí)），也可以在視察者的明視距離處（當(dāng)A'B'在圖中焦點(diǎn)F2之右邊時(shí)）。目鏡的作用與放大鏡一樣。所不同的只是眼睛通過(guò)目鏡所看到的不是物體本身，而是物體被物鏡所成的已經(jīng)放大了一次的像。 （三） 顯微鏡的重要光學(xué)技巧參數(shù) 在鏡檢時(shí)，人們總是盼望能清晰而明亮的幻想圖象，這就須要顯微鏡的各項(xiàng)光學(xué)技巧參數(shù)到達(dá)必定的尺度，并且請(qǐng)求在應(yīng)用時(shí)，必須依據(jù)鏡檢的目標(biāo)和實(shí)際情況來(lái)和諧各參數(shù)的關(guān)系。只有這樣，才干充足施展顯微鏡應(yīng)有的性能，得到滿(mǎn)足的鏡檢后果。 顯微鏡的光學(xué)技術(shù)參數(shù)包含：數(shù)值孔徑、分辨率、放大率、焦深、視場(chǎng)寬度、覆蓋差、工作距離等等。這些參數(shù)并不都是越高越好，它們之間是相互接洽又相互制約的，在使用時(shí)，應(yīng)依據(jù)鏡檢的目標(biāo)和實(shí)際情形來(lái)調(diào)和參數(shù)間的關(guān)系，但應(yīng)以保證分辨率為準(zhǔn)。 1． 數(shù)值孔徑 數(shù)值孔徑簡(jiǎn)寫(xiě)NA，數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的重要技術(shù)參數(shù)，是斷定兩者（尤其對(duì)物鏡而言）性能高下的主要標(biāo)記。其數(shù)值的大小，分辨標(biāo)刻在物鏡和聚光鏡的外殼上。 數(shù)值孔徑（NA）是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率（n）和孔徑角（u）半數(shù)的正弦之乘積。用公式表現(xiàn)如下：NA=nsinu/2 孔徑角又稱(chēng)"鏡口角"，是物鏡光軸上的物體點(diǎn)與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度?？讖浇窃酱?，進(jìn)入物鏡的光通亮就越大，它與物鏡的有效直徑成正比，與焦點(diǎn)的距離成反比。 顯微鏡觀察時(shí)，若想增大NA值，孔徑角是無(wú)法增大的，唯一的措施是增大介質(zhì)的折射率n值?；谶@一原理，就產(chǎn)生了水浸物鏡和油浸物鏡，因介質(zhì)的折射率n值大于1，NA值就能大于1。 數(shù)值孔徑Zui大值為1.4，這個(gè)數(shù)值在理論上和技術(shù)上都達(dá)到了極限。目前，有用折射率高的溴萘作介質(zhì)，溴萘的折射率為1.66,所以NA值可大于1.4。 這里必需指出，為了充足施展物鏡數(shù)值孔徑的作用，在觀察時(shí)，聚光鏡的NA值應(yīng)即是或略大于物鏡的NA值。 數(shù)值孔徑與其他技術(shù)參數(shù)有著親密的關(guān)系，它幾乎決定和影響著其他各項(xiàng)技巧參數(shù)。它與分辨率成正比，與放大率成正比，與焦深成反比，NA值增大，視場(chǎng)寬度與工作距離都會(huì)相應(yīng)地變小。 2． 分辨率 顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清楚區(qū)分的兩個(gè)物點(diǎn)的Zui小間距，又稱(chēng)"辨別率"。其盤(pán)算公式是σ=λ/NA 式中σ為Zui小分辨距離；λ為光線的波長(zhǎng)；NA為物鏡的數(shù)值孔徑?？梢?jiàn)物鏡的分辯率是由物鏡的NA值與照明光源的波長(zhǎng)兩個(gè)因素決定。NA值越大，照明光線波長(zhǎng)越短，則σ值越小，分辨率就越高。要進(jìn)步分辨率，即減小σ值，可采用以下辦法（1） 下降波長(zhǎng)λ值，使用短波長(zhǎng)光源。（2） 增大介質(zhì)n值以進(jìn)步NA值（NA=nsinu/2）。（3） 增大孔徑角u值以提高NA值。（4） 增添明暗反差。 3． 放大率和有效放大率 由于經(jīng)過(guò)物鏡和目鏡的兩次放大，所以顯微鏡總的放大率Γ應(yīng)當(dāng)是物鏡放大率β和目鏡放大率Γ1的乘積： Γ=βΓ1 顯然，和放大鏡相比，顯微鏡可以具有高得多的放大率，并且通過(guò)更換不同放大率的物鏡和目鏡，能夠便利地改變顯微鏡的放大率。 放大率也是顯微鏡的重要參數(shù)，但也不能盲目信任放大率越高越好。顯微鏡放大倍率的極限即有效放大倍率。 分辨率和放大倍率是兩個(gè)不同的但又互有接洽的概念。有關(guān)系式：500NA<Γ<1000NA 當(dāng)選用的物鏡數(shù)值孔徑不夠大，即分辨率不夠高時(shí)，顯微鏡不能分清物體的微細(xì)結(jié)構(gòu)，此時(shí)即使過(guò)度地增大放大倍率，得到的也只能是一個(gè)輪廓雖大但細(xì)節(jié)不清的圖像，稱(chēng)為無(wú)效放大倍率。反之假如分辨率已滿(mǎn)足請(qǐng)求而放大倍率不足，則顯微鏡雖已具備辨別的能力，但因圖像太小而仍然不能被人眼清晰視見(jiàn)。所認(rèn)為了充足施展顯微鏡的分辨能力，應(yīng)使數(shù)值孔徑與顯微鏡總放大倍率公道匹配。 4． 焦深 焦深為焦點(diǎn)深度的簡(jiǎn)稱(chēng)，即在應(yīng)用顯微鏡時(shí)，當(dāng)焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)某一物體時(shí)，不僅位于該點(diǎn)平面上的各點(diǎn)都可以看清晰，而且在此平面的高低一定厚度內(nèi)，也能看得清晰，這個(gè)明白部分的厚度就是焦深。焦深大, 可以看到被檢物體的全層，而焦深小，則只能看到被檢物體的一薄層，焦深與其他技術(shù)參數(shù)有以下關(guān)系：（1） 焦深與總放大倍數(shù)及物鏡的數(shù)值孔徑成反比。（2） 焦深大，分辨率下降。 由于低倍物鏡的景深較大，所以在低倍物鏡照相時(shí)造成艱苦。在顯微照相時(shí)將具體先容。 5． 視場(chǎng)直徑（Field Of View） 觀察顯微鏡時(shí)，所看到的明亮的圓形范疇叫視場(chǎng)，它的大小是由目鏡里的視場(chǎng)光闌決議的。視場(chǎng)直徑也稱(chēng)視場(chǎng)寬度，是指在顯微鏡下看到的圓形視場(chǎng)內(nèi)所能容納被檢物體的實(shí)際規(guī)模。視場(chǎng)直徑愈大，愈便于觀察。有公式 F=FN/β 式中F: 視場(chǎng)直徑，F(xiàn)N：視場(chǎng)數(shù)（Field Number, 簡(jiǎn)寫(xiě)為FN，標(biāo)刻在目鏡的鏡筒外側(cè)），β:物鏡放大率。由公式可看出：（1） 視場(chǎng)直徑與視場(chǎng)數(shù)成正比。（2） 增大物鏡的倍數(shù)，則視場(chǎng)直徑減小。因此，若在低倍鏡下可以看到被檢物體的全貌，而換成高倍物鏡，就只能看到被檢物體的很小一部份。 6． 籠罩差 顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)也包括蓋玻片在內(nèi)。由于蓋玻片的厚度不標(biāo)準(zhǔn)，光線從蓋玻片進(jìn)進(jìn)空氣產(chǎn)生折射后的光路產(chǎn)生了轉(zhuǎn)變，從而發(fā)生了相差，這就是覆蓋差?；\罩差的產(chǎn)生影響了顯微鏡的成響質(zhì)量。 國(guó)際上規(guī)定，蓋玻片的尺度厚度為0.17mm，允許范疇在0.16-0.18mm，在物鏡的制作上已將此厚度規(guī)模的相差盤(pán)算在內(nèi)。物鏡外殼上標(biāo)的0.17，即表明該物鏡所要求的蓋玻片的厚度。 7． 工作距離WD 工作距離也叫物距，即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。鏡檢時(shí)，被檢物體應(yīng)處在物鏡的一倍至二倍焦距之間。因此，它與焦距是兩個(gè)概念，平時(shí)習(xí)慣所說(shuō)的調(diào)焦，實(shí)際上是調(diào)節(jié)工作距離。 在物鏡數(shù)值孔徑一定的情形下，工作間隔短孔徑角則大。 數(shù)值孔徑大的高倍物鏡，其工作距離小。 （四） 物鏡 物鏡是顯微鏡Zui主要的光學(xué)部件，應(yīng)用光線使被檢物體第一次成象，因而直接關(guān)系和影響成象的質(zhì)量和各項(xiàng)光學(xué)技術(shù)參數(shù)，是權(quán)衡一臺(tái)顯微鏡質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)。 物鏡的構(gòu)造龐雜，制造精密，由于對(duì)象差的校正，金屬的物鏡筒內(nèi)由相隔一定距離并被固定的透鏡組組合而成。物鏡有很多具體的要求，如合軸,齊焦。 齊焦既是在鏡檢時(shí)，當(dāng)用某一倍率的物鏡觀察圖象清楚后，在轉(zhuǎn)換另一倍率的物鏡時(shí)，其成象亦應(yīng)基礎(chǔ)清晰，而且象的中心偏離也應(yīng)當(dāng)在必定的規(guī)模內(nèi)，也就是合軸水平。齊焦性能的優(yōu)劣和合軸水平的高下是顯微鏡 質(zhì)量的一個(gè)主要標(biāo)記，它是與物鏡的本身質(zhì)量和物鏡轉(zhuǎn)換器的精度有關(guān)。 現(xiàn)代顯微物鏡已達(dá)到高度完美，其數(shù)值孔徑已接近極限，視場(chǎng)中心的分辯率與理論值之差別已微乎其微。但持續(xù)增大顯微物鏡視場(chǎng)與提高視場(chǎng)邊沿成象質(zhì)量的可能性仍然存在，這種研討工作，至今仍在進(jìn)行。 顯微物鏡與目鏡在參于成象這點(diǎn)上是有差別的。物鏡是顯微鏡Zui龐雜和Zui重要的部分，在寬光束中工作(孔徑大)，但這些光束與光軸的傾角較小(視場(chǎng)小)；目鏡在窄光束中工作，但其傾角大（視場(chǎng)大）。當(dāng)盤(pán)算物鏡與目鏡，在打消象差上有很大差異。 與寬光束有關(guān)的象差是球差、慧差以及地位色差；與視場(chǎng)有關(guān)的象差是象散、場(chǎng)曲、畸變以及倍率包差。 顯微物鏡是一消球差系統(tǒng)。這意味著：就軸上的一對(duì)共軛點(diǎn)而言，排除了球差并且實(shí)現(xiàn)了正弦條件時(shí)，每一物鏡僅有兩個(gè)這種消球差點(diǎn)。因此，物體與象的計(jì)算位置的任何轉(zhuǎn)變均導(dǎo)致象差變大。 1． 物鏡的重要參數(shù)（1） 放大率β （2） 數(shù)值孔徑NA （3） 機(jī)械筒長(zhǎng)L：在顯微鏡中，物鏡支承面到目鏡支承面之間的距離稱(chēng)為機(jī)械筒長(zhǎng)。對(duì)于一臺(tái)顯微鏡來(lái)說(shuō)，機(jī)械筒長(zhǎng)是固定的。我國(guó)規(guī)定機(jī)械筒長(zhǎng)是160毫米。（4） 蓋玻片厚度d （5） 工作距離WD 這些參數(shù)，大多刻在物鏡筒上，如圖3所示。有一種所謂筒長(zhǎng)無(wú)窮的顯微物鏡，這種物鏡的后方一般帶有輔助物鏡（也叫補(bǔ)償物鏡或鏡筒物鏡），被察看物體位于物鏡前焦點(diǎn)上，經(jīng)過(guò)物鏡以后，成像在無(wú)窮遠(yuǎn)，再經(jīng)過(guò)輔助物鏡成像在輔助物鏡的焦平面上，如圖4所示。在物鏡和幫助物鏡之間是平行光，所以中間距離比擬自由一些，可以參加棱鏡等光學(xué)元件。 2． 物鏡的根本類(lèi)型（1） 按顯微鏡鏡筒長(zhǎng)度（以mm計(jì)）：透射光用160鏡筒，帶0.17mm厚或更厚的蓋玻片；反射光用190鏡筒，不帶蓋玻片；透射光與反射光用鏡筒，筒長(zhǎng)無(wú)限大。（2） 按浸法特點(diǎn)：非浸式(干式)、浸式(油浸、水浸、甘油浸及其它浸法)。（3） 按光學(xué)裝置：透射式、反射式以及折反射式。（4） 按數(shù)值孔徑和放大倍數(shù)：低倍(NA≤0.2與β≤10X)，中倍(NA≤0.65與β≤40X)，高倍(NA＞0.65與β＞40X)。（5） 按校正象差的情形不同，通常分為消色差物鏡，半復(fù)消色差物鏡，復(fù)消色差物鏡，平視場(chǎng)消色差物鏡，平視場(chǎng)復(fù)消色差物鏡和單色物鏡。 a. 消色差物鏡（Achromatic objective）這是運(yùn)用Zui普遍的一類(lèi)顯微物鏡，外殼上常有"Ach"字樣。它校正了軸上點(diǎn)的位置色差（紅，藍(lán)二色）、球差（黃綠光）和正弦差，堅(jiān)持了齊明條件。軸外點(diǎn)的象散不超過(guò)容許值(－4屬光度)，二級(jí)光譜未校正。數(shù)值孔徑為0.1~0.15的低倍消色差物鏡一般由兩片透鏡膠合在一起的雙膠物鏡構(gòu)成。數(shù)值孔徑至0.2的消色差物鏡由兩組雙膠透鏡構(gòu)成。當(dāng)數(shù)值孔徑增大到0.3時(shí)，再參加一平凸透鏡，該平凸透鏡決議著物鏡的焦距，而其它透鏡則補(bǔ)償由其平面與球面產(chǎn)生的象差。高倍物鏡的平面象差可用浸法排除。高倍消色差物鏡一般均為浸式，由四部分構(gòu)成：前片透鏡、新月形透鏡及兩個(gè)雙膠透鏡組。 b. 復(fù)消色差物鏡（Apochromatic objective）這類(lèi)物鏡的結(jié)構(gòu)龐雜，透鏡采取了特種玻璃或螢石等資料制造而成，物鏡的外殼上標(biāo)有"Apo"字樣。它對(duì)兩個(gè)色光實(shí)現(xiàn)了正弦條件，要求嚴(yán)厲地校正軸上點(diǎn)的位置色差（紅，藍(lán)二色）、球差（紅，藍(lán)二色）和正弦差，同時(shí)請(qǐng)求校正二級(jí)光譜（再校訂綠光的位置色差）。其倍率色差并不能完整校正，一般須用目鏡補(bǔ)償。由于對(duì)各種象差的校正極為完美，比響應(yīng)倍率的消色差物鏡有更大的數(shù)值孔徑，這樣不僅分辨率高，象質(zhì)量?jī)?yōu)而且也有更高的有效放大率。因此，復(fù)消色差物鏡的性能很高，實(shí)用于高等研討鏡檢和顯微照相。 c. 半復(fù)消色差物鏡（Semi apochromatic objective）半復(fù)消色差物鏡又稱(chēng)氟石物鏡，物鏡的外殼上標(biāo)有"FL"字樣。在結(jié)構(gòu)上透鏡的數(shù)目比消色差物鏡多，比復(fù)消色差物鏡少，成象質(zhì)量上，遠(yuǎn)較消色差物鏡為好，接近于復(fù)消色差物鏡。 d. 平視場(chǎng)物鏡（Plan objective ）平場(chǎng)物鏡是在物鏡的透鏡體系中增長(zhǎng)一快半月形的厚透鏡，以到達(dá)校訂場(chǎng)曲的缺點(diǎn)，提高視場(chǎng)邊沿成像質(zhì)量的目標(biāo)。平場(chǎng)物鏡的視場(chǎng)平坦，更實(shí)用于鏡檢和顯微照相。對(duì)于平視場(chǎng)消色差物鏡，其倍率色差不大，不必用特別目鏡補(bǔ)償。而平視場(chǎng)復(fù)消色差物鏡，則必需用目鏡來(lái)補(bǔ)償它的倍率色差。 e. 單色物鏡這類(lèi)物鏡由石英、熒石或氟化鋰制的一組單片透鏡構(gòu)成。只能在紫外線光譜區(qū)的個(gè)別區(qū)內(nèi)應(yīng)用(寬度不超過(guò)20mm)，可見(jiàn)光譜區(qū)不能采用單色物鏡。這類(lèi)物鏡均制成反射式與折反射式系統(tǒng)。主要毛病是相當(dāng)大一部分光束在中心被掩蔽(入瞳面積的25%)。在新型折反射系統(tǒng)中，由于采用半透明反射鏡以及物鏡的膠合構(gòu)造，使這一缺陷大為減輕，從而可以撤消反射鏡框的遮光。并且兩同軸反射鏡的殘余象差是互相補(bǔ)償?shù)?，同時(shí)用透鏡組來(lái)增大數(shù)值孔徑。若體系的校訂滿(mǎn)足，孔徑達(dá)到NA=1.4時(shí)，中心掩蔽可不超過(guò)進(jìn)瞳面積的4%。 f. 特種物鏡所謂"特種物鏡"是在上述物鏡的基本上，專(zhuān)門(mén)為到達(dá)某些特定的觀察效果而設(shè)計(jì)制作的。主要有以下幾種： (a) 帶校正環(huán)物鏡（Correction collar objective）在物鏡的中部裝有環(huán)裝的調(diào)節(jié)環(huán)，當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)環(huán)時(shí)，可調(diào)節(jié)物鏡內(nèi)透鏡組之間的距離，從而校正由蓋玻片厚度不標(biāo)準(zhǔn)引起的籠罩差。調(diào)節(jié)環(huán)上的刻度可從0 .11--.023,在物鏡的外殼上也標(biāo)科有此數(shù)字，表明可校正蓋玻片從0.11-0.23mm厚度之間的誤差。 (b) 帶虹彩光闌的物鏡（Iris diaphragm objective）在物鏡鏡筒內(nèi)的上部裝有虹彩光闌，外方也可以旋轉(zhuǎn)的調(diào)節(jié)環(huán)，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)可調(diào)節(jié)光闌孔徑的大小，這種構(gòu)造的物鏡是高等的油浸物鏡，它的作用是在暗視場(chǎng)鏡檢時(shí)，往往由于某些原因而使照明光線進(jìn)入物鏡，使視場(chǎng)背景不夠黑暗，造成鏡檢質(zhì)量的降低。這時(shí)調(diào)節(jié)光闌的大小，使背景變黑，使被檢物體更明亮，加強(qiáng)鏡檢后果。 (c) 相襯物鏡（Phase contrast objective）這種物鏡是由于相襯鏡檢術(shù)的專(zhuān)用物鏡，其特色是在物鏡的后焦平面處裝有相板。 (d) 無(wú)罩物鏡（No cover objective）有些被檢物體，如涂抹制片等，上面不能加用蓋玻片，這樣在鏡檢時(shí)應(yīng)使用無(wú)罩物鏡，否則圖象質(zhì)量將顯著降落，特殊是在高倍鏡檢時(shí)更為顯明。這種物鏡的外殼上常標(biāo)刻NC，同時(shí)在蓋玻片厚度的位置上沒(méi)有0.17的字樣，而標(biāo)刻著"0"。 (e) 長(zhǎng)工作間隔物鏡這種物鏡是顛倒顯微鏡的專(zhuān)用物鏡，它是為了滿(mǎn)足組織培育，懸浮液等資料的鏡檢而設(shè)計(jì)。 （五） 目鏡 目鏡的作用是把物鏡放大的實(shí)象（中間象）再放大一級(jí)，并把物象映入觀察者的眼中，本質(zhì)上目鏡就是一個(gè)放大鏡。已知顯微鏡的分辨率能力是由物鏡的數(shù)值孔徑所決議的，而目鏡只是起放大作用。因此，對(duì)于物鏡不能分辨出的結(jié)構(gòu)，目鏡放的再大，也仍然不能分辨出。 （六） 聚光鏡 聚光鏡裝在載物臺(tái)的下方。小型的顯微鏡往往無(wú)聚光鏡，在使用數(shù)值孔徑0.40以上的物鏡時(shí)，則必須具有聚光鏡。聚光鏡不僅可以補(bǔ)充光量的不足和恰當(dāng)轉(zhuǎn)變從光源射來(lái)的光的性質(zhì)，而且將光線聚焦于被檢物體上，以得到Zui好的照明后果。 聚光鏡的的結(jié)構(gòu)有多種，同時(shí)依據(jù)物鏡數(shù)值孔徑的大小，相應(yīng)地對(duì)聚光鏡的要求也不同 。 1． 阿貝聚光鏡（Abbe condenser） 這是由德國(guó)光學(xué)大學(xué)巨匠恩斯特.阿貝(Ernst Abbe)設(shè)計(jì)。阿貝聚光鏡由兩片透鏡組成，有較好的聚光才能，但是在物鏡數(shù)值孔徑高于0.60時(shí)，則色差，球差就顯示出來(lái)。因此，多用于普通顯微鏡上。 2． 消色差聚光鏡(Achromatic aplanatic condenser ) 這種聚光鏡又名"消球差聚光鏡"和"齊明聚光鏡"，它由一系列透鏡組成，它對(duì)色差球差的校正水平很高，能得到幻想的圖象，是明場(chǎng)鏡檢中質(zhì)量Zui高的一種聚光鏡，其N(xiāo)A值達(dá)1.4 。因此，蔡司鏡片，在高等研討顯微鏡常配有此種聚光鏡。它不適用于4 X以下的低倍物鏡，否則照明光源不能充斥全部視場(chǎng)。 3． 搖出式聚光鏡（Swing out condenser） 在使用低倍物鏡時(shí)（如4X），由于視場(chǎng)大，光源所形成的光錐不能充斥真全部視場(chǎng)，造成視場(chǎng)邊沿部分黑暗，只中心部分被照亮。要使視場(chǎng)布滿(mǎn)照明，就需將聚光鏡的上透鏡從光路中搖出。 4． 其它聚光鏡 聚光鏡除上述明場(chǎng)使用的類(lèi)型外，還有作特別用圖的聚光鏡。如暗視場(chǎng)聚光鏡，相襯聚光鏡，偏光聚光鏡，微分干預(yù)聚光鏡等，以上聚光鏡分離實(shí)用于相應(yīng)的視察方法。（七） 照明辦法 顯微鏡的照明方式按其照明光束的形成，可分為"透射式照明"，和"落射式照明"兩大類(lèi)。前者適用于透明或半透明的被檢物體，盡大數(shù)生物顯微鏡屬于此類(lèi)照明法；后者則適用于非透明的被檢物體，光源來(lái)自上方，又稱(chēng)""反射式照明"。重要利用與金相顯微鏡或熒光鏡檢法。 1． 透射式照明 生物顯微鏡多用來(lái)觀察透明標(biāo)本，須要以透射光來(lái)照明。有兩種照明方法（1） 臨界照明（Critical illumination） 光源經(jīng)過(guò)聚光鏡后，成像于物平面上，如圖5所示。若疏忽光能的喪失，則光源像的亮度與光源本身雷同，因此，這種方法相當(dāng)于在物平面上放置光源。顯然，在臨界照明中，假如光源表面亮度不均勻，或顯明地表示出渺小的結(jié)構(gòu)，如燈絲等，那么就要嚴(yán)重影響顯微鏡觀察效果，這是臨界照明的毛病。其補(bǔ)救的辦法是在光源的前方放置乳白和吸熱濾色片，使照明變得較為均勻和避免光源的長(zhǎng)時(shí)光的照耀而損傷被檢物體。用透射光照明時(shí)，物鏡成像光束的孔徑角，被聚光鏡像方光束的孔徑角所決定，為使物鏡的數(shù)值孔徑得到充分應(yīng)用，聚光鏡應(yīng)有與物鏡雷同或稍大的數(shù)值孔徑。 （2） 柯拉照明 臨界照明中物面光照度不均勻的毛病，在柯拉照明中可以打消。在光源1與聚光鏡5之間加一幫助聚光鏡2，如圖6所示?？梢?jiàn)，由于不是直接把光源，而是把被光源均勻照明了的幫助聚光鏡2（也稱(chēng)為柯拉鏡）成像在標(biāo)本6上，所以物鏡的視場(chǎng)（標(biāo)本）得到均勻的照明。 2． 落射式照明在視察不透明物體時(shí)，例如通過(guò)金相顯微鏡觀察金屬磨片，往往是采取從側(cè)面或者從上面加以照明的方式。此時(shí)，被觀察物體的表面上沒(méi)有蓋玻璃片，標(biāo)本像的發(fā)生是靠進(jìn)入物鏡的反射或散射光線。如圖7所示。 3． 用暗視場(chǎng)來(lái)觀察微粒的照明方式用暗視場(chǎng)辦法可以觀察超顯微質(zhì)點(diǎn)。所謂超顯微質(zhì)點(diǎn)，是指那些小于顯微鏡辨別極限的渺小質(zhì)點(diǎn)。暗視場(chǎng)照明的原理是：不使主要的照明光線進(jìn)入物鏡，能夠進(jìn)入物鏡成像的只是由微粒所散射的光線。因此，在暗的背景上給出了亮的微粒的像，視場(chǎng)背景雖暗，但襯度（對(duì)照）很好，可以使分辨率提高。 暗視場(chǎng)照明又有單向和雙向之分（1） 單向暗視場(chǎng)照明 圖8是單向暗視場(chǎng)照昭示意圖。由圖可見(jiàn)，由照明器2發(fā)出的光線，經(jīng)不透明的標(biāo)本片1反射后，主要的光線都沒(méi)有進(jìn)入物鏡3，進(jìn)進(jìn)物鏡的光線主要是由微?；蛲拱疾黄降募?xì)部所散射的光線。顯然，這種單向的暗視場(chǎng)照明，對(duì)察看微粒的存在和活動(dòng)是有效的，但對(duì)物體細(xì)節(jié)的再現(xiàn)不是有效的，即存在"失真"的現(xiàn)象。（2） 雙向暗視場(chǎng)照明 雙向暗視場(chǎng)照明，可以清除單向所發(fā)生的失真缺陷。在普通的三透鏡聚光鏡前面，安頓一個(gè)環(huán)形光闌，如圖9即可實(shí)現(xiàn)雙向暗視場(chǎng)照明。在聚光鏡的Zui后一片與載物玻璃片之間浸以液體，而蓋玻璃片與物鏡之間是干的。于是，經(jīng)過(guò)聚光鏡的環(huán)形光束，在蓋玻璃片內(nèi)全反射而不能進(jìn)入物鏡，形成如圖中的回路。進(jìn)入物鏡的只是由標(biāo)本上的微粒所散射的光線，形成了雙向暗視場(chǎng)照明。 四、 光學(xué)顯微鏡的組成結(jié)構(gòu)光學(xué)顯微鏡包括光學(xué)系統(tǒng)和機(jī)械裝置兩大部分，而數(shù)碼顯微鏡還包含數(shù)碼攝像體系，現(xiàn)分述如下：（一） 機(jī)械裝置 1． 機(jī)架 顯微鏡的主體部分，包含底座和彎臂。 2． 目鏡筒 位于機(jī)架上方，靠圓形燕尾槽與機(jī)架固定，目鏡插在其上。根占有否攝像功效，可分為雙目鏡筒和三目鏡筒；根據(jù)瞳距的調(diào)節(jié)方法不同，可分為鉸鏈?zhǔn)胶推揭剖健?3． 物鏡轉(zhuǎn)換器 它是一個(gè)旋轉(zhuǎn)圓盤(pán)，上有3～5個(gè)孔，分離裝有低倍或高倍物鏡鏡頭。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器就可讓不同倍率的物鏡進(jìn)入工作光路。 4． 載物臺(tái) 是放置玻片的平臺(tái)，其中心具有通光孔。臺(tái)上有一個(gè)彈性的標(biāo)本夾，用來(lái)夾住載玻片。右下方有移動(dòng)手柄，使載物臺(tái)面可在XY雙方向進(jìn)行移動(dòng)。 5． 調(diào)焦機(jī)構(gòu) 應(yīng)用調(diào)焦手輪可以驅(qū)動(dòng)調(diào)焦機(jī)構(gòu)，使載物臺(tái)作粗協(xié)調(diào)微調(diào)的升降活動(dòng)，從而使被觀察物體對(duì)焦清晰成像。 6． 聚光器調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu) 聚光器安裝在其上，調(diào)節(jié)螺旋可以使聚光器升降，用以調(diào)節(jié)光線的強(qiáng)弱。（二） 光學(xué)系統(tǒng) 1． 目鏡 它是插在目鏡筒頂部的鏡頭，由一組透鏡組成，可以使物鏡成倍地辨別、放大物像，例如10X、15X等。依照所能看到的視場(chǎng)大小，目鏡可分為視場(chǎng)較小的普通目鏡，和視場(chǎng)較大的大視場(chǎng)目鏡(或稱(chēng)廣角目鏡)兩類(lèi)。較高級(jí)顯微鏡的目鏡上還裝有視度調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)，操作者可以便利快捷地對(duì)左右眼分辨進(jìn)行視度調(diào)劑；此外，在這些目鏡上可以加裝丈量分劃板，丈量分劃板的象總能清晰地調(diào)焦在標(biāo)本的焦面上；并且，為了防止目鏡被取走以及減少運(yùn)輸中被破壞的可能性，這些目鏡可以被鎖定。 2． 物鏡 它安裝在轉(zhuǎn)換器的孔上，也是由一組透鏡組成的，能夠把物體清楚地放大。物鏡上刻有放大倍數(shù)，主要有10X、40X、60X、100X等。高倍物鏡中多采取浸液物鏡，即在物鏡的下表面和標(biāo)本片的上表面之間填充折射率為1.5左右的液體（如杉木油），它能明顯的進(jìn)步顯微觀察的分辨率。 3． 光源 有鹵素?zé)?、鎢絲燈、汞燈、熒光燈、金屬鹵化物燈等。 4． 聚光器 包括聚光鏡、孔徑光闌。聚光鏡由透鏡組成，它可以集中透射過(guò)來(lái)的光線，使更多的光能集中到被察看的部位?？讖焦怅@可把持聚光器的通光范疇，用以調(diào)節(jié)光的強(qiáng)度。（三） 數(shù)碼攝像系統(tǒng) 1． 攝像頭 2． 圖像采集卡 3． 軟件 4． 微機(jī) 五、 光學(xué)顯微鏡的分類(lèi)光學(xué)顯微鏡有多種分類(lèi)方式：按使用目鏡的數(shù)目可分為雙目和單目顯微鏡；按圖像是否有立體感可分為立體視覺(jué)和非立體視覺(jué)顯微鏡；按觀察對(duì)像可分為生物和金相顯微鏡等；按光學(xué)原理可分為偏光、相襯和微差干預(yù)對(duì)照?/
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