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生涯的細菌在【明視野顯微鏡】下察看是透明的，不易看清。暗視野顯微鏡的原理與來自縫隙的一束強光通過暗室時，可明白地看到其中細微灰塵的現(xiàn)象是一樣的，即給樣品照明的光不直接穿過物鏡，而是由樣品上反射或折射的光進進物鏡，那么，在黝黑的視野中，由于反差增大了，使樣品能夠看得更清晰。因用暗視野法可以在黑暗的視野中看到光明的菌體，故在視察生涯細菌及細菌活動時常采取此法。

　　【暗視野顯微鏡】的結構重要是采取一種特別的聚光器，在聚光器的下方中心為圓形黑盤所遮，光僅由周緣進進，使光會聚于載玻片上，并斜照物體，物體經斜射照明后，發(fā)出反射光可進進物鏡，這樣，造成顯微鏡視野黑暗，而其中的物體明亮。如無暗視野顯微鏡時，只需將明視野顯微鏡上的聚光器取下，換上暗視野聚光器即可；也可在明視野顯微鏡聚光器下面的濾光鏡支架上放一片星形擋板（star diaphragm）（圖Ⅲ-6）構成暗視野，這種方式實用于低倍鏡察看。

　　在暗視野中，由于有些活細胞其外表比逝世細胞明亮，所以暗視野也被用來區(qū)分逝世、活細胞，此技巧現(xiàn)已被用于各種酵母細胞的逝世、活辨別。

【相差顯微鏡】具有兩個其他顯微鏡所不具有的功效:①將直射的光(視野中背景光)與經物體衍射的光離開;②將大約一半的波長從相位中除往，使之不能發(fā)生相互作用，從而引起強度的變更。

　　相差顯微鏡的基礎原理是，應用物體不同構造成分之間的折射率和厚度的差異，把通過物體不同部分的光程差改變?yōu)檎穹ü鈴姸龋┑牟町悾涍^帶有環(huán)狀光闌的聚光鏡和帶有相位片的相差物鏡實現(xiàn)觀測的顯微鏡。重要用于視察活細胞或不染色的組織切片，有時也可用于察看缺乏反差的染色樣品。

【微分干預顯微鏡】的物理原理完整不同于相差顯微鏡，技巧設計要龐雜得多。DIC應用的是偏振光，有四個特別的光學組件：偏振器（polarizer）、DIC棱鏡、DIC滑行器和檢偏器（analyzer）。偏振器直接裝在聚光體系的前面，使光線產生線性偏振。在聚光器中則安裝了石英Wollaston棱鏡，即DIC棱鏡，此棱鏡可將一束光分解成偏振方向不同的兩束光（x和y），二者成一小夾角。聚光器將兩束光調劑成與顯微鏡光軸平行的方向。Zui初兩束光相位一致，在穿過標原形鄰的區(qū)域后，由于標本的厚度和折射率不同，引起了兩束光產生了光程差。在物鏡的后焦面處安裝了第二個Wollaston棱鏡，即DIC滑行器，它把兩束光波合并成一束。這時兩束光的偏振面（x和y）仍然存在。Zui后光束穿過第二個偏振裝置，即檢偏器。在光束形成目鏡DIC影像之前，檢偏器與偏光器的方向成直角。檢偏器將兩束垂直的光波組合成具有雷同偏振面的兩束光，從而使二者產生干預。x和y波的光程差決議著透光的多少。光程差值為0時，沒有光穿過檢偏器；光程差值即是波長一半時，穿過的光到達Zui大值。于是在灰色的背景上，標本構造浮現(xiàn)出亮暗差。為了使影像的反差到達Zui佳狀況，可通過調節(jié)DIC滑行器的縱行微調來轉變光程差，光程差可轉變影像的亮度。調節(jié)DIC滑行器可使標本的細微構造出現(xiàn)出正或負的投影形象，通常是一側亮，而另一側暗，這便造成了標本的人為三維立體感，相似大理石上的浮雕。