簡答
1. 光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)組成:根本結(jié)構(gòu)包括光學(xué)系統(tǒng)和機(jī)械系統(tǒng)兩大部分。光學(xué)系統(tǒng)是顯微鏡的主體部分,包括物鏡、目鏡、聚光鏡及反光鏡等組成的照明裝置。機(jī)械系統(tǒng)是為了保證光學(xué)系統(tǒng)的成像而配置的,包括調(diào)焦系統(tǒng)、載物臺和物鏡轉(zhuǎn)換器等運(yùn)動夾持部件以及底座、鏡臂、鏡筒等支撐部件。照明設(shè)置的主要部件有光源、濾光器、聚光鏡和玻片等。
2. 電阻抗血細(xì)胞分析技巧的利用及毛?。哼\(yùn)用:電阻抗原理可進(jìn)行白細(xì)胞計數(shù)和分群、血小板計數(shù)、紅細(xì)胞計數(shù)、紅細(xì)胞均勻體積和血小板均勻體積測定及獲得其他相干參數(shù)等。缺陷:①白細(xì)胞分類計數(shù)不特異;②技術(shù)所限,影像紅細(xì)胞有關(guān)參數(shù)的正確性;③血小板計數(shù)的干擾因素多;④不易發(fā)明異常細(xì)胞。
3. 電阻抗(庫爾特)血細(xì)胞檢測原理:血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為相對的不良導(dǎo)體,其電阻值大于稀釋溶液的電阻值;當(dāng)血細(xì)胞通過檢測器的孔徑感受區(qū)時,檢測器內(nèi)外電極之間的恒流源電路的電阻值瞬間增大,產(chǎn)生電壓脈沖信號;脈沖信號數(shù)即是通過的細(xì)胞數(shù),脈沖信號幅度大小與細(xì)胞大小成正比。
4. 血凝儀常用檢測原理:①凝固法:通過檢測血漿在凝血激活劑作用下一系列物理量(光、電、超聲、機(jī)械活動等)的變化,再由盤算機(jī)分析所得到數(shù)據(jù)并將之換算成終極成果,故也稱為生物物理法。按丈量原理可分為電流法、超聲分析法、光學(xué)法和磁珠法四種。②底物顯色法:通過測定產(chǎn)色底物的吸光度變更來推測所測物質(zhì)的含量和活性,故也稱為生物化學(xué)法。③免疫學(xué)方式:以純化的被檢物資為抗原,制備相應(yīng)的抗體,然后利用抗原抗體反映對被檢物進(jìn)行定性或定量測定。試驗(yàn)室應(yīng)用的辦法有:免疫擴(kuò)散法、火箭電泳法、雙向免疫電泳法、酶標(biāo)法、免疫比濁法。血凝儀使用免疫比濁法。
5. 尿液剖析儀的檢測原理:把試劑帶浸進(jìn)尿液中后,除了空缺塊外,其余的試劑塊都因和尿液產(chǎn)生了化學(xué)反映而發(fā)生了顏色的變更。試劑塊的色彩深淺與光的接收和反射水平有關(guān),顏色越深,相應(yīng)某種成分濃度越高,接收光量值越大,發(fā)射光量值越小,反射率也越小。反之,反射率越大。即色彩的深淺與光的反射率成比例關(guān)系,而顏色的深淺又與尿液中各種成分的濃度成比例關(guān)系。所以只要測得光的反射率既可以求得尿液中各種成分的濃度。
6. 酶標(biāo)儀的性能評價指標(biāo):酶標(biāo)儀的性能評價指標(biāo)有濾光片波長精度檢討及其峰值測定、敏銳度和正確度、通道差與孔間差檢測、零點(diǎn)漂移、精密度評價、線性測定、雙波長評價等。
7. 電化學(xué)反對數(shù)放大器的作用:電解質(zhì)分析儀,測無機(jī)離子及血?dú)夥治鲋袦y二氧化碳,在信號處置中,應(yīng)用反對數(shù)放大器,原因是,其電極測定的是電位差,而依據(jù)Nernst方程電位差與離子的活度(濃度)的對數(shù)值成線性,故求離子活度時,要通過反對數(shù)放大器將點(diǎn)位差取反對數(shù)。
8. 臨床檢驗(yàn)儀器分類:通常以臨床檢驗(yàn)的方式為主對臨床檢驗(yàn)儀器進(jìn)行分類,或以檢驗(yàn)儀器的工作原理為主對臨床檢驗(yàn)儀器進(jìn)行分類。
9. 臨床檢驗(yàn)儀器常用的性能指標(biāo):一個精良的檢驗(yàn)儀器應(yīng)具有的性能指標(biāo)有:敏銳度好、精度高、噪音小、誤差小、辨別率高、可靠性、反復(fù)性好、響應(yīng)敏捷、線性范疇寬和穩(wěn)固性好。
10. 光學(xué)顯微鏡工作原理:顯微鏡是由兩組會聚透鏡組成的光學(xué)折射成像系統(tǒng),利用光學(xué)原理,把人眼所不能辨別的渺小的物體放大成像,供人們提取物質(zhì)微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。把焦距較短、靠近察看物、成實(shí)像的透鏡組成為物鏡,而焦距較長,靠近眼鏡、成虛像的透鏡組成為目鏡。被視察物體位于物鏡的前方,被物鏡作第一級放大后成一倒立的實(shí)像,然后此實(shí)像再被目鏡作第二級放大,得到Zui大放大后果的倒立的虛像,位于人眼的明視間隔處。
11. 光學(xué)顯微鏡的性能參數(shù)有哪些,這些參數(shù)間的影響和制約關(guān)系如何:顯微鏡的性能參數(shù)主要有放大率、數(shù)值孔徑、辨別率、視場、景深與焦長、鏡像亮度、鏡像清楚度、工作間隔和機(jī)械筒長。顯微鏡的數(shù)值孔徑與其放大率成正比,與分辯率、景深成反比,它的平方與圖像亮度成正比。因此,使用較大數(shù)值孔徑的物鏡,其放大率和分辯本事較高,但視場、景深、工作間隔較小。
13. 掃描電鏡與透射電鏡相比有哪些特色:①能夠直接察看你樣品表面的結(jié)構(gòu),樣品的尺寸可大至120mm*80mm*50mm;②樣品制備過程簡略,不用切成薄片;③樣品可以在樣品室中作三度空間的平移和旋轉(zhuǎn),因此,可以從各種角度對樣品進(jìn)行察看;④景深大,圖像富有立體感。掃描電鏡的景深較光學(xué)顯微鏡大幾百倍,比透射電鏡大幾十倍;⑤圖像的放大規(guī)模廣,分辯率也比擬高。可放大十幾倍到幾十萬倍,它基礎(chǔ)上包括了從放大鏡、光學(xué)顯微鏡直到透射電鏡的放大范圍,分辨率介于光學(xué)顯微鏡與透射電鏡之間,可達(dá)3nm;⑥電子束對樣品的損傷與污染水平較??;⑦在視察形貌的同時,還可利用從樣品發(fā)出的其他信號作微區(qū)成分分析。
14. 光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡的重要差別:①照明源不同②透鏡不同③成像原理不同④所用標(biāo)本制備方法不同。
15. 離心機(jī)的工作原理:離心是應(yīng)用旋轉(zhuǎn)活動的離心力以及物資的沉降系數(shù)或浮力密度的差別進(jìn)行分別、濃縮和提純生物樣品的一種方式。懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于宏大的離心力作用,使懸浮的渺小顆粒以必定的速度沉降,從而使溶液得以分別。顆粒的沉降速度取決于離心機(jī)的轉(zhuǎn)速、顆粒的質(zhì)量、大小和密度。微粒在重力場下移動的速度與微粒的大小、形態(tài)、密度、重力場的強(qiáng)度及液體的粘度有關(guān)。離心機(jī)就是應(yīng)用離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)發(fā)生的強(qiáng)盛的離心力,迫使液體中微粒戰(zhàn)勝擴(kuò)散加快沉降速度,把樣品中就有不同沉降系數(shù)和浮力密度的物資分分開。
16. 常用的離心方法:平衡離心法、等密度離心法、經(jīng)典式沉降平衡離心法。
17. 什么是速率區(qū)帶離心法:速率區(qū)帶離心辦法是依據(jù)分別的粒子在離心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,離心后具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度層內(nèi)形成幾條離開的樣品區(qū)帶,到達(dá)彼此分離的目標(biāo)。
18. 什么是等密度區(qū)帶離心法:當(dāng)不同顆粒存在浮力密度差時,在離心力場下,顆?;蛳蛳鲁两?,或向上浮起,一直沿梯度移動到它們密度恰好相等的地位上(即等密度點(diǎn))形成區(qū)帶,稱為等密度區(qū)帶離心法。
19. 離心機(jī)主要技術(shù)參數(shù):Zui大轉(zhuǎn)數(shù):離心轉(zhuǎn)頭可到達(dá)的Zui大轉(zhuǎn)速,單位是rpm。Zui大離心力:離心機(jī)可產(chǎn)生的Zui大相對離心力場RCF,單位是g。Zui大容量:離心機(jī)一次可分離樣品的Zui大體積,通常表現(xiàn)為m*n,m為一次可容納的Zui多離心管數(shù),n為一個離心管課容納分離樣品的Zui大體積,單位是ml。調(diào)速規(guī)模:離心機(jī)磚頭轉(zhuǎn)速可調(diào)劑的范疇。溫度節(jié)制范疇:離心機(jī)工作時可把持的樣品溫度規(guī)模。工作電壓:一般指離心機(jī)電極工作所需的電壓。電源功率:通常指離心機(jī)電機(jī)的額定功率。
20. 離心轉(zhuǎn)頭常用標(biāo)志:FA固定角轉(zhuǎn)頭 V垂直轉(zhuǎn)頭 SW甩平式轉(zhuǎn)頭 CF持續(xù)流動轉(zhuǎn)頭 Z區(qū)帶轉(zhuǎn)頭 Ti鈦或鈦合金制成
21. 在電解分析儀中,如何進(jìn)行電極體系的頤養(yǎng):電極系統(tǒng)的保養(yǎng)重要包含鈉電極、鉀電極、氯電極和參比電極的保養(yǎng)。保持逐日用廠家供給的干凈液和鈉電極調(diào)劑液進(jìn)行清洗和調(diào)劑時Zui基礎(chǔ)的保養(yǎng)。鉀電極為選擇性膜電極,使用過程中會吸附蛋白質(zhì),影響電極的響應(yīng)敏銳度。每月至少調(diào)換一次內(nèi)充液。氯電極為選擇性膜電極,應(yīng)用進(jìn)程中亦會吸附蛋白質(zhì),Zui好用物理法進(jìn)行膜電極的干凈。每周均須要檢討參比電極內(nèi)是否足夠的飽和氯化鉀溶液及氯化鉀殘片。一般三個月要換一次參比電極膜。
22. 簡述血?dú)夥治鰞x的根本構(gòu)造及工作原理:血?dú)夥治鰞x的基礎(chǔ)構(gòu)造可分為電極、管路和電路三大部分,其工作原理:被測血液樣品在管路系統(tǒng)的抽吸下,進(jìn)入樣品室內(nèi)的測量毛細(xì)管中。測量毛細(xì)管的管壁上開有四個孔,孔內(nèi)分離插有PH、PCO2和PO2三支丈量電極和一支參比電極。其中,PH和PH參比電極共同組成對PH值的測量系統(tǒng)。血液樣品進(jìn)進(jìn)樣品室的測量管后,管路體系結(jié)束抽吸,樣品同時被四個電極所感測,。電極產(chǎn)生對應(yīng)于PH、PCO2和PO2三項參數(shù)的電信號,這些電信號分辨經(jīng)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換后送到微處理機(jī)。經(jīng)微處理機(jī)系統(tǒng)處理、預(yù)算后,再分離送到各自的顯示單元顯示或打印機(jī)打印出測量成果。測量系統(tǒng)的所有部件包含溫度節(jié)制、管道系統(tǒng)的動作等均由微機(jī)或計算機(jī)芯片把持。
23. 在血?dú)夥治鰞x中,如何對PH電機(jī)進(jìn)行頤養(yǎng):PH電極的頤養(yǎng)辦法是:假如PH電極在空氣中裸露2h以上,應(yīng)將其放在緩沖液中浸泡6h~24h才干使用。血液中的蛋白質(zhì)輕易粘附在電極表面,必需經(jīng)常按血液→緩沖液(或生理鹽水)→水→空氣的次序進(jìn)行清洗。亦可用隨機(jī)附送的含蛋白水解酶的清洗液或自配的0.1%胃蛋白酶鹽酸溶液浸泡30分鐘以上,用生理緩沖液洗凈后浸泡備用。若清洗后仍不能正常工作,應(yīng)調(diào)換電極。
24. 主動化血造就檢測和剖析系統(tǒng)按檢測原理可分為哪幾類以及各類型的工作原理:以檢測造就基導(dǎo)電性和電壓為基本的血培育系統(tǒng):血培養(yǎng)基中因含有不同電解質(zhì)而具有必定導(dǎo)電性。微生物在生長代謝的過程中可產(chǎn)生質(zhì)子、電子和各種帶電荷的原子團(tuán),通過電極檢測培養(yǎng)基的導(dǎo)電性或電壓可斷定有無微生物生長;利用測壓原理的血造就系統(tǒng):很多細(xì)菌生長過程中,常伴有接收或產(chǎn)賭氣體現(xiàn)象,因此可應(yīng)用培養(yǎng)瓶內(nèi)壓力的轉(zhuǎn)變檢測微生物的生長情形;采取光電原理監(jiān)測的血培養(yǎng)體系:微生物在代謝進(jìn)程中發(fā)生的CO2引起培養(yǎng)基pH值及氧化還原電位轉(zhuǎn)變。利用光電比色檢測血培育瓶中某些代謝產(chǎn)物量的轉(zhuǎn)變,可判定有無微生物生長。
25. 采取光電原理監(jiān)測的血培育系統(tǒng),按檢測手腕可分為哪幾類:可分成BioArgos系統(tǒng)、BacT/Alert系統(tǒng)、Bactec9000系列和Vital系統(tǒng)等四類。
26. 簡述流式細(xì)胞儀生物學(xué)顆粒分析原理:經(jīng)特異熒光染料染色后的樣品沿流動室的軸心向下賤動,流動室軸心至外壁的鞘液也向下賤動,形成包繞細(xì)胞懸液的鞘液流,鞘液和樣品流在噴嘴鄰近組成一個圓柱流束,與程度方向的激光束垂直相交。染色的細(xì)胞受激光照耀后發(fā)出熒光,這些信號分辨被光電倍增管接受,經(jīng)過計算機(jī)儲存、盤算、分析這些數(shù)字化信息,就可得到細(xì)胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性質(zhì)等物理和生化指標(biāo)。
27. 簡述流式細(xì)胞儀細(xì)胞分選原理:當(dāng)某類細(xì)胞的特征與要分選的細(xì)胞雷同時,流式細(xì)胞儀就會在這類細(xì)胞形成液滴時給含有這類細(xì)胞的液滴充以特定的電荷,帶有電荷的液滴向著落入偏轉(zhuǎn)板間的靜電場時,依所帶電荷的不同分辨向左偏轉(zhuǎn)或向右偏轉(zhuǎn),落入指定的收集器內(nèi),不帶電的液滴不產(chǎn)生偏轉(zhuǎn),垂直落入廢液槽中被排出,從而到達(dá)細(xì)胞分類收集的目標(biāo)。
28. 流式細(xì)胞儀所檢測的信號有哪些?這些信號所代表的意義和作用是什么:流式細(xì)胞儀所檢測的信號有散射光和熒光信號。散射光信號:散射光分為前向角散射和側(cè)向角散射,兩個參數(shù)組合,可區(qū)分經(jīng)裂解紅細(xì)胞處置后外周血白細(xì)胞中淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞三個細(xì)胞群體,或在未驚醒裂解紅細(xì)胞處置的全血樣品找出血小板和紅細(xì)胞等細(xì)胞群體。熒光信號:一種是細(xì)胞自身在激光照耀下發(fā)出微弱的熒光信號,另一種是經(jīng)過特異熒光素標(biāo)志細(xì)胞后,受激發(fā)照耀得到的熒光信號,通過對這類熒光信號的檢測和定量剖析能懂得所研討細(xì)胞的存在和定量。
29. 結(jié)合檢測型BCA在白細(xì)胞分類上重要有哪些技術(shù):①電容、電導(dǎo)、光散射聯(lián)合檢測技術(shù)②電阻抗、射頻與細(xì)胞化學(xué)結(jié)合檢測技術(shù)③多角度激光散射、電阻抗結(jié)合檢測技巧④光散射與細(xì)胞化學(xué)檢測技術(shù)。
30. 簡述雙磁路磁珠法的測定原理:屬磁電檢測原理。在測試杯的兩側(cè)各有一組驅(qū)動線圈,它們產(chǎn)生恒定的交替電磁場,使測試杯內(nèi)特制的往磁小鋼珠堅持等振幅振蕩運(yùn)動;凝血酶激活劑參加后,隨著纖維蛋白的增多,小鋼珠的運(yùn)動振幅逐漸削弱;另一組丈量線圈感應(yīng)到小鋼珠活動變更;儀器將運(yùn)動幅度衰減到50%時斷定為凝固終點(diǎn)。
31. 簡述試劑帶構(gòu)造:采取多層膜結(jié)構(gòu),第一層尼龍膜起到維護(hù)作用,防止大分子物質(zhì)對反映的污染;二層絨制層,包含碘酸鹽層的試劑層, 碘酸鹽層可損壞維生素C等干擾物質(zhì),試劑層含有試劑成分,主要與尿液中所測定物質(zhì)產(chǎn)生化學(xué)反響,產(chǎn)生色彩變化;第三層是固定有試劑的吸水層,可使尿液均勻快速地浸進(jìn),并能克制尿液流到相鄰反響區(qū);Zui后一層選取尿液不浸潤的塑料片作為支撐體。
32. 尿沉渣分析儀的幾大類型:迄今為止尿沉渣分析儀大致有兩類,一類是通過尿沉渣直接鏡檢再進(jìn)行影像分析,得出相應(yīng)的技術(shù)材料與試驗(yàn)成果;另一類是流式細(xì)胞術(shù)分析。
33. 簡述流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀的工作原理:測定是利用流式細(xì)胞術(shù)的電阻抗原理進(jìn)行的。當(dāng)一個尿標(biāo)本被稀釋并經(jīng)染色后,靠液壓作用通過鞘液流動池。反響樣品從樣品噴嘴出口進(jìn)入鞘液流動室時,被一種無粒子顆粒的鞘液包抄,使每個細(xì)胞以單個縱列的情勢通過流動池的中心軸線,在這里每個尿液細(xì)胞被氬激光光束照射。每個細(xì)胞有不同水平的熒光強(qiáng)度、前向散射光強(qiáng)度和電阻抗的大小。儀器將這種熒光,散射光等光信號改變成電信號,并對各種信號進(jìn)行分析,Zui后得到每個尿液標(biāo)本產(chǎn)生出的直方圖和散射圖。通過火析這些圖形,即可區(qū)分每個細(xì)胞并得出有關(guān)細(xì)胞的形態(tài)。
34. PCR分類:普通PCR擴(kuò)增儀和實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增儀,其中普通PCR擴(kuò)增儀包括普通定性PCR擴(kuò)增儀、梯度PCR儀、原位PCR儀,普通定性PCR擴(kuò)增儀又分為水浴式PCR儀、變溫金屬塊式PCR儀、變溫氣流式PCR儀。實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增儀包括金屬板式實(shí)時定量PCR儀、離心式實(shí)時定量PCR儀、各孔獨(dú)立控溫的定量PCR儀
35. 什么是聚合酶鏈(PCR)技術(shù):PCR技巧的實(shí)質(zhì)是核酸擴(kuò)增技術(shù),通過加熱使雙鏈DNA解開螺旋,在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和適合的PH緩沖液存在條件下延長引物,反復(fù)上述“變性→退火→引物→延長”進(jìn)程至25-40個循環(huán),呈指數(shù)級擴(kuò)展待測樣本中的核酸拷貝數(shù),可以在體外對目標(biāo)核酸進(jìn)行大批復(fù)制。
盤算題公式
離心力 FC=mω2r=m(2πN/60)2r=(4π2N2rm)/3600 ω是旋轉(zhuǎn)角速度,N是每分鐘轉(zhuǎn)頭旋轉(zhuǎn)次數(shù),r是離心半徑,m是質(zhì)量。相對離心力:RCF=FC/mg 沉降系數(shù):(dx/dt)/ω2r 離心場力: rω2
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