血栓與止血常用篩選試驗(yàn)包含毛細(xì)血管脆性試驗(yàn)、出血時(shí)間測(cè)定、血小板計(jì)數(shù)、血塊收縮試驗(yàn)、凝血時(shí)間測(cè)定、血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定和活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定。這些試驗(yàn)中,前四項(xiàng)試驗(yàn)主要反映了血管壁和血小板在血栓與止血中的作用。其中,出血時(shí)間和血小板計(jì)數(shù)兩項(xiàng)Zui常用。在反映凝血機(jī)制方面,除了血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定是本書中唯一代表外源凝血道路的試驗(yàn)外,其余三項(xiàng)均屬檢討內(nèi)源性凝血的試驗(yàn),以活部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定Zui敏感。關(guān)于抗凝體系和纖溶體系的篩選試驗(yàn)將由《血液學(xué)和血液學(xué)檢驗(yàn)》先容。
一、毛細(xì)血管脆性實(shí)驗(yàn)
[原理]毛細(xì)血管壁的完全性有賴于毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)、功能和血小板質(zhì)和量的正常,也與某些體液因素有在。當(dāng)這些因至少有缺點(diǎn)時(shí),毛細(xì)血管的完全性就受到損壞。毛細(xì)血管脆性試驗(yàn)或稱束臂試驗(yàn)是在上臂給靜脈及毛細(xì)血治理體制外加“尺度壓力”、增添血管負(fù)荷,察看前臂必定規(guī)模內(nèi)此膚出血點(diǎn)當(dāng)選量的方法。本試驗(yàn)主要反應(yīng)毛細(xì)血管構(gòu)造和功能,也與血小板質(zhì)和量有關(guān)。
[辦法學(xué)評(píng)價(jià)] 本實(shí)驗(yàn)對(duì)檢查毛細(xì)血管壁的缺點(diǎn)比檢討血小板的缺陷稍敏感。但總體而言,也僅是一個(gè)粗略的指標(biāo)。很多有血管或血小板異常并有出血癥狀的病人,本試驗(yàn)可呈假陰性;而很多無(wú)癥狀的人可以呈陽(yáng)性,重要利用于新生兒由于檢討新生兒毛細(xì)管及血小板的功效無(wú)法應(yīng)用與成人一樣的方式。
[參考值] 陽(yáng)性:男性5個(gè)出血點(diǎn);女性10個(gè)出血點(diǎn)。
[臨床意義]
1.病理性CFT陽(yáng)性見(jiàn)于:①毛細(xì)血管有缺點(diǎn)的疾?。喝邕z傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)大癥,本試驗(yàn)較有價(jià)值,還有壞血病、過(guò)敏性紫癜、老年性紫癜等;②血小板有缺陷的疾?。涸l(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、血小板無(wú)力癥、血管性血友病(von willebrand disease,VWD)、血小板病;③其它:偶見(jiàn)于嚴(yán)重的凝血異常;毛細(xì)血管造成損傷的疾病,如敗血癥、尿毒癥、肝臟疾病、慢性肝炎、血栓性血小板減少性紫癜。
2.少數(shù)正凡人CFT可呈陽(yáng)性,尤其是婦女。因此CFT臨床價(jià)值不大。
二、出血時(shí)間測(cè)定
[原理 ]在必定條件下,人為刺破皮膚毛細(xì)血管后,從血液自然注出到自然結(jié)束所需的時(shí)光,稱為出血蛙間測(cè)定(bleeding time,BT )。 Bt 測(cè)定受血小板的數(shù)目和質(zhì)量、毛細(xì)血管構(gòu)造和功效以及血小板與毛細(xì)血管之間相互作用的影響,而受血液固因子含量及活性作用影響較小。
[方法學(xué)評(píng)價(jià) ]
BT測(cè)定是篩選試驗(yàn)中唯一的體內(nèi)的試驗(yàn)。傳統(tǒng)方法有Duke法和 IVy 法,目前推舉使用標(biāo)準(zhǔn)化出血時(shí)間測(cè)定器法(template bleeding time,TBT )。
BT測(cè)定的影響因素有:皮膚切口深度、長(zhǎng)度、地位、方向,毛細(xì)血管所受壓力;皮膚溫度等。其中,Zui主要的因素是切口的深度。對(duì)兒童、老年、有瘢痕形成史的患者,可用瘀點(diǎn)計(jì)替換TBT 作出血時(shí)間測(cè)定(表3-2 )。
表3-2 三種出血時(shí)間測(cè)定方法比擬
TBt 法
IVy 法
Duke 法
刺血部位 前臂;個(gè)體差異小
同左
耳垂;個(gè)體差別大
固定加壓 上臂:成人53kpa
同左
不加壓
切口標(biāo)準(zhǔn)化 標(biāo)準(zhǔn)化切口深度、長(zhǎng)度
未標(biāo)準(zhǔn)化
未尺度化
檢測(cè)敏感性 Zui敏感
較敏感
不敏感
檢測(cè)重復(fù)性 佳
尚可
差
器材與操作 血壓計(jì),測(cè)定器,刺血針
同左,但無(wú)測(cè)定器
僅需刺血針
使用現(xiàn)狀 國(guó)際上推舉使用
雖普遍使用但正趨向淘汰
已趨向淘汰
Duke 法是在耳垂采血,固然操作簡(jiǎn)便,但全部操作難發(fā)標(biāo)準(zhǔn)化,且很不敏感,特殊是對(duì)血管性血友病的檢測(cè);故已漸被淘汰。
IVY 法采血部位在前臂掌側(cè)。在上臂用壓脈帶施加固定壓力,然后在前臂規(guī)定的范疇內(nèi)作切口。敏感性較好。但因切口深度、長(zhǎng)度仍未能尺度化,故反復(fù)性不如在其基本上改良后的TBT 法。
TBT 法是較幻想的方法。TBT 是在 IVy 出血時(shí)間測(cè)定方法上經(jīng)改良后目前Zui有效的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定法,由于使用標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)定器,因此能使此膚切口的長(zhǎng)度和深度恒定,使試驗(yàn)重復(fù)性比傳統(tǒng)方法顯明提高,有利于檢出血管壁及血小板質(zhì)和量的缺陷。而且依據(jù)須要不同型號(hào)的測(cè)定器,可作為不同長(zhǎng)度和深度的標(biāo)準(zhǔn)切口,實(shí)用于不同年紀(jì)的患者。
測(cè)定器法對(duì)前臂的切口有兩種:刀刃長(zhǎng)軸與前臂垂直的為水平切口,與前臂平行的為垂直的切口;水平切口第三性高,為首先方法,但對(duì)4 個(gè)月以下的嬰兒宜作垂直切口,以免形成疤痕。
[ 參考值] TBT 法( Simplate Ⅱ型): 2.3~9.5min
IVY 法 2~7min
Duke 法:1~3min(不超過(guò) 4min )
[臨床意義 ]由于臨床上由藥物治療引起的BT 延伸常見(jiàn),故測(cè)定前應(yīng)細(xì)心訊問(wèn)病人用藥情況,如是否服用阿司匹林、抗炎藥、口服抗凝藥及某些抗生素等。
1 .BT 延伸
( 1 )血小板數(shù)量異常:①原發(fā)性血小板減少紫癜、血栓性血小板減少紫癜(可因藥物、中毒、沾染、免疫等原因引起);②血小板增多癥,如原發(fā)性血小板增多癥。
(2)血小板功能缺陷:①先本性血小板病如血小板無(wú)力癥;②獲得性血小板病如藥物引起的血小板病、骨髓增生異常綜合癥等。
(3)血管性血友病(VWD)。
(4)血管壁及構(gòu)造異常(少見(jiàn))遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)大癥等。
(5)偶見(jiàn)于嚴(yán)重的凝血因子缺少:如凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ或纖維蛋白缺乏;彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC);也見(jiàn)于接收大批輸血后患者。
2.BT縮短:重要見(jiàn)于某些嚴(yán)重的血栓前狀況和血栓形成時(shí)。如妊娠高血壓綜合征、心肌梗逝世、腦血管病變、DIC高凝期等,均可因血管壁侵害,血小板或背后血因子活性過(guò)度加強(qiáng)所致。
三、血小板計(jì)數(shù)
[原理]血小板計(jì)數(shù)(blood platelet count,BPC)的基礎(chǔ)原理,同血液的白細(xì)胞或紅細(xì)胞計(jì)數(shù)法。
[方法學(xué)評(píng)價(jià)]血小板由于體積小,特殊是輕易發(fā)生粘附、湊集和變性破壞,故常難以準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。目前血小板計(jì)數(shù)方法主要有兩大類:血細(xì)胞分析儀法和目視顯微鏡計(jì)數(shù)法(前者的計(jì)數(shù)法參見(jiàn)本書第二章)。目視顯微鏡計(jì)數(shù)法有普通光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)法(分為直接法和間接法,但后者已被淘汰)和相差顯微鏡法。
1.普通光鏡直接計(jì)數(shù)法:因稀釋液成分沒(méi),有多種計(jì)數(shù)方式??煞譃閮深悾孩贀p壞紅細(xì)胞的溶血法;例如草酸銨稀釋液法對(duì)紅細(xì)胞破壞力強(qiáng),血小板計(jì)數(shù)產(chǎn)生艱苦,也有用赤血鹽血小板稀釋者,此劑穩(wěn)固,可在室溫下長(zhǎng)期保留而不變質(zhì),但如稀釋20倍或40倍,則紅細(xì)胞破壞不完整。②不不破壞紅細(xì)胞辦法:有復(fù)方碘稀釋液法。因紅細(xì)胞未破壞,可能掩飾血小板,且液易生長(zhǎng)微生物而干擾計(jì)數(shù),已被淘汰。
2.相差顯微鏡直接計(jì)數(shù)法:用草酸銨作稀釋液,在顯明的顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù),并可于照相后核對(duì)計(jì)數(shù)。此法正確性高,血小板易于辨認(rèn)。
3.血細(xì)胞分析儀法:此法由于反復(fù)性好,適于臨床利用,目前血液細(xì)胞剖析儀逐步普及,一般均發(fā)全血作為標(biāo)本,比用富含血小板漿測(cè)定簡(jiǎn)便。但由于血細(xì)胞剖析儀計(jì)數(shù)法不能完整將血小板與其它相似大小的物資(如紅細(xì)胞或白細(xì)胞碎片、灰法等雜物)差別開(kāi)來(lái),因此計(jì)數(shù)成果有時(shí)仍需目視顯微鏡計(jì)數(shù)作校訂,因而國(guó)內(nèi)外仍將目視顯微鏡計(jì)數(shù)(特殊是相差別顯微鏡計(jì)數(shù)法)作為參考方法。
在各種稀釋液中,無(wú)論主動(dòng)血細(xì)胞剖析儀法或顯微鏡計(jì)數(shù)法,多以草酸銨溶血法作為參考(國(guó)內(nèi)亦將此稀釋液定為首先方式)。
現(xiàn)代的多參數(shù)血液細(xì)胞分析儀還可應(yīng)用丈量細(xì)胞的原理計(jì)算出均勻血小板體積。
[參考值] 普通顯微鏡計(jì)數(shù)法:(100~300)×109L
[臨床意義]
1.生理性:正凡人血小板計(jì)數(shù)一天內(nèi)可有6-10%變更;表示為凌晨較低,先后略高;春季較低,冬季略高;平原居民較低,高原較高;靜脈血比毛細(xì)血管血高10%;月經(jīng)前降你,月經(jīng)后升高;妊娠中晚期升高,分娩后即下降;活動(dòng)后升高,休息后恢復(fù)。
2.病理性
(1)在臨床上,除創(chuàng)傷之外,血小板減少引起出血常見(jiàn)原因。血小板數(shù)大于100×109L,無(wú)異常出血;當(dāng)小于50×109L時(shí),可有出血癥狀。常見(jiàn)的疾病有:①血小板天生障礙,如急性白血病、再生障礙性貧血;②血小板損壞過(guò)多,如ITP、脾功能亢進(jìn),系統(tǒng)性紅斑狼瘡;③血小板耗費(fèi)增多,如DIC、血栓性血小板減少紫癜。
(2)血小板增多(血小板數(shù)大于400×10L);①骨髓增生性疾病:慢性粒細(xì)胞白血病,真性紅細(xì)胞增多癥;②原發(fā)性血小板增多癥;③急性大出血,急性溶庫(kù)存,急性化膿性沾染;④脾切手術(shù)后。
血小板計(jì)數(shù)與血小板均勻體積的關(guān)系見(jiàn)本書第二章。
四、血塊收縮試驗(yàn)
[原理] 完整凝固的新穎血塊,在血小板壓縮蛋白的作用下,使纖維蛋白網(wǎng)收縮,血塊縮小,血清析出,使血塊的止血作用更加堅(jiān)固,在必定的條件下,按規(guī)定的時(shí)光察看血塊收縮情形或盤算血塊壓縮率,即為血塊收縮實(shí)驗(yàn)。CRT與血小板數(shù)目與質(zhì)量、凝血酶原、纖維蛋白原和因子Ⅻ濃度以及血小板數(shù)目有關(guān),但重要反應(yīng)了血小板的質(zhì)量。
[方法學(xué)評(píng)價(jià)]
1.定性法:靜脈血(可應(yīng)用度管法凝血時(shí)間測(cè)定后血標(biāo)本)靜置于37攝多度水浴箱中,在不同時(shí)間內(nèi)分辨察看血塊收縮情形。本法為簡(jiǎn)略的定性辦法,可作為臨床上粗略斷定血小板的功效之用。有條件的單位,Zui好采取血塊壓縮定量法試驗(yàn),成果較正確。
2.定量法:①全血定量法(Macfarlane法):將靜脈血注進(jìn)有刻度的離心管,待血凝固后增除血塊,再將離心管血清離心后,讀取血清量,盤算血塊收縮率。此法需同時(shí)作用紅細(xì)胞比積測(cè)定。②血漿定量法:先制備富血小板血漿,然后參加氯化鈣或凝血酶,使血漿凝固,往除血漿凝塊,讀取血精體積,再盤算血塊收縮率。由于有更正確的血小板功能試驗(yàn),CRT現(xiàn)已少用。
[參考值] 定性法:30-60min開(kāi)端收縮,24h完全收縮。
定量法Macfarlane法 48-60%
血漿法:40%
[臨床意義]
1.血塊收縮不良或血塊不收縮見(jiàn)于:①血小板功能異常:如血小板無(wú)力癥;②血小板數(shù)減少:當(dāng)血小板數(shù)小于50×109L時(shí),血塊收縮明顯減退,如ITP;③纖維蛋白原、凝血酶原的嚴(yán)重減少;④原發(fā)性或繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥(由于血塊內(nèi)紅細(xì)胞多,體積大,血塊收縮受到限制);⑤異常蛋白血癥:如多發(fā)性骨髓。
2.血塊過(guò)度收縮見(jiàn)于:①先本性或獲得性因子Ⅷ缺少癥;②嚴(yán)重貧血(紅細(xì)胞少血塊收縮水平增添)。
五、凝血時(shí)間測(cè)定
[原理] 新穎血液離體后,因子被異物表面(玻璃)激活,啟動(dòng)了內(nèi)源性凝血。由于血液中含有內(nèi)源性凝血所需的全體凝血因子、血小板及鈣離子,血液則產(chǎn)生凝固。血液凝固所需時(shí)間即為凝血時(shí)間(clotting rime,CT)。
[方法學(xué)評(píng)價(jià)]凝血時(shí)間測(cè)定,依據(jù)標(biāo)原來(lái)源有:
毛細(xì)血管采血法:可用玻片法或毛細(xì)血管法測(cè)定。由于采血進(jìn)程易混入較多組織液因而即使有內(nèi)源性凝血因子缺乏,也仍產(chǎn)生外源性凝血,使本該異常的結(jié)果變?yōu)檎?。本法極不敏感,僅能檢測(cè)出Ⅷ:C水平2%的血友病患者,漏檢率達(dá)95%故屬于淘汰的方法。
靜脈采血法:由于血液中較少的混進(jìn)組織液,因此對(duì)內(nèi)源凝血因子缺少的第三性比毛細(xì)血管采血法要高。目前有3種檢測(cè)法:
(1)普通試管法(Lee-White法):僅能Ⅷ:C水平2%的患者,本法不敏感目前也趨于淘汰。
(2)硅管法(SCT):本法與普通試管法的測(cè)定方法基礎(chǔ)雷同,唯一的差別是采取涂有硅油的試管。由于硅管內(nèi)壁不易使內(nèi)壁凝血因子接觸活化,故凝血時(shí)間比普通試管法長(zhǎng),也較第三可檢出因子Ⅷ:C水平45%患者。
(3)活化凝血時(shí)間(activated clotting rime,ACT)法:本法是在待檢全血中參加白陶土部分凝血活酶懸液,先充足激活接觸活化系統(tǒng)的凝血因子Ⅶ、Ⅺ等,并為凝血反映供給豐盛的催化表面,從而進(jìn)步了試驗(yàn)的第三性,是內(nèi)源性體系第三的篩選試驗(yàn)之一,能檢出Ⅷ:C程度45%亞臨床血友病。ACT法也是監(jiān)護(hù)體外循環(huán)肝素用量的較好的指標(biāo)之一。
以上測(cè)定凝血時(shí)間的各種方法,在檢測(cè)內(nèi)源性凝血因子缺乏方面,無(wú)論敏感性或精確性均不如活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定(APPT)。
[參考值] 普通試管法:5~10min
硅管法:15~32min
活化凝血時(shí)光法:1.1~2.1min
[臨床意義]
1.CT延長(zhǎng)①較明顯的因子Ⅷ、Ⅸ減少的血友病甲、乙凝血因子缺乏癥;②血管性血友病;③嚴(yán)重的因子Ⅴ、Ⅹ、纖維蛋白抗凝劑、應(yīng)用肝素以及低纖維蛋白原血癥;④繼發(fā)性或原發(fā)性纖溶活氣加強(qiáng);⑤循環(huán)血液中的抗?jié)q物,如抗因子Ⅷ抗體因子搞體、SLE等。
2.CT縮短①血栓前狀況:DIC高凝期等;②血栓性疾病如心肌梗逝世,不穩(wěn)固心絞痛、腦血管病變、溏尿病行之有效管病變、肺梗逝世、深靜脈血栓形成、妊高征、腎病綜合征及高血溏、高血脂等。
六.復(fù)鈣時(shí)間測(cè)定
[原理] 在往鈣離子的抗凝血漿中,重新加入適量的鈣后,血漿就發(fā)生凝固,這一進(jìn)程所閱歷的時(shí)間即為復(fù)鈣時(shí)間(recalcification time,RT)。
[方法學(xué)評(píng)價(jià)]通常有兩種方法:①表面玻璃皿法:本法比試管法敏感,但不如試管法簡(jiǎn)便。②試管法:僅用試管替換玻璃皿作試驗(yàn)。
RT測(cè)定方法也有改進(jìn),如以高速離心貧血小板血漿(platelet-poor plasma,PPp ,)因子血漿血小板減少測(cè)定結(jié)果時(shí)間較長(zhǎng);也有在血漿中加汲活劑的方法,稱活化復(fù)鈣時(shí)間。RT試管法雖較凝血時(shí)間普通試管方法敏感,但也只能檢出Ⅷ:C4%的血友病患者,目前應(yīng)用較少。
[參考值] 玻璃皿法:97~160s
試管法(PRP法):90~160s
(PPP法):90~200s
(ART法):50s
[臨床意義] 同凝血時(shí)間測(cè)定。但較為敏感,某些輕型血友病患者本試驗(yàn)可延伸。
七、血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定
[原理]在抗凝血漿中,加進(jìn)足夠量的組織凝血活酶(組織因子,TF)和適量的鈣離子,即可滿足外源凝血的全體條件。從參加鈣離子到血漿凝固所需在的時(shí)間即稱為血漿凝血酶原時(shí)間。PT的是非反應(yīng)了血漿中凝血酶原、纖維蛋白原和因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的程度。
[方法學(xué)評(píng)價(jià)] 一步法凝血酶原時(shí)間測(cè)定:由Quick在1935年創(chuàng)立。該法是在抗凝血漿中直接加入試劑一次完成測(cè)定,因此稱一步法。當(dāng)時(shí)以為該試驗(yàn)只反映了凝血酶原的活性(因子未發(fā)明凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ)。原使用草酸鈉液作為抗凝劑,后來(lái)發(fā)明此液不利于凝血因子和保留,故已改用枸櫞酸鈉作抗凝劑。一步法PT常用靜脈抗凝血普通試管法手工測(cè)定;也有用毛細(xì)血管微量抗血測(cè)定,雖采血量少,但操作較繁瑣,故少用;也可用表面玻皿法測(cè)定,準(zhǔn)確性較并管法高,而操作不如后者簡(jiǎn)便。近年來(lái),多采取半自動(dòng)或全自動(dòng)血液凝固儀測(cè)定,也以呈現(xiàn)纖維蛋白絲作為終點(diǎn)。
手工法雖反復(fù)性差、耗時(shí),但仍有相當(dāng)水平的精確性,故仍普遍運(yùn)用,其中以手工傾斜試管法為參考方法。半自動(dòng)儀法,進(jìn)步了光天化日確度和速度,但存在標(biāo)本交叉污染的毛病。全主動(dòng)儀法戰(zhàn)勝了半主動(dòng)儀法不足之處,使檢測(cè)更加準(zhǔn)確、快速、敏感與便利。
組織凝血活酶試劑質(zhì)量是影響PT測(cè)定準(zhǔn)確性Zui主要的因素之一。組織凝血活酶的不同起源,不同制備方法,使務(wù)試驗(yàn)室之間及每批試劑之間PT測(cè)定的結(jié)果差異大,可比性差,特別影響對(duì)口服抗凝血?jiǎng)┗颊咧委熀蠊臄喽ǎ虼嗽缭?967年,WHO就將功贖罪6740批號(hào)人腦凝血活酶標(biāo)準(zhǔn)品,作為以后制備不同來(lái)源的血活酶的參考物,并請(qǐng)求計(jì)算和供給每批組織凝血活酶的國(guó)際敏感指數(shù)。ISI表現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)品組織凝血活酶與每批組織凝血活酶PT校訂曲線的斜率,即在雙對(duì)數(shù)的坐標(biāo)紙上,縱坐標(biāo)為用標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定的PT對(duì)數(shù)值,橫坐標(biāo)為用待校正的組織凝血活酶測(cè)定的雷同標(biāo)本PT的對(duì)數(shù)值。6040的ISI為1.0。ISI值越低,表現(xiàn)試劑愈敏感。目前務(wù)國(guó)大體是用國(guó)示標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)化自己制備的本國(guó)國(guó)度標(biāo)準(zhǔn)品。新的組織凝血活酶標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)自兔或牛的制備。其它各種組織凝血活酶劑的ISI必須依照新的標(biāo)準(zhǔn)品ISI進(jìn)行校訂。其次,WHO等國(guó)際的要威機(jī)構(gòu)還請(qǐng)求,PT正常對(duì)照值必須至少來(lái)自20名以上男女各半的混雜血漿所測(cè)定得結(jié)果。并且還規(guī)定姨口服抗凝劑的患者必需使用國(guó)際PT結(jié)果報(bào)告形成,并用認(rèn)為抗凝治療監(jiān)護(hù)的指標(biāo),INR=(病人凝血酶原時(shí)間正凡人均勻凝血酶原進(jìn)間)ISI。作PT測(cè)定時(shí),首先應(yīng)懂得所用的組織凝積存活酶試劑的ISI,ISI值通常由發(fā)生試劑的廠商供給的,測(cè)定PT后,即可計(jì)算出INR。為使用便利,INR也可從制作商提供的圖表中查提,Zui初規(guī)定INR必須使用手工法測(cè)得,在引入自動(dòng)化凝血儀后,為了不影響INR的可靠性,制作商還應(yīng)提供儀器相應(yīng)的ISI值。使用ISi 和INR可減少或去除各實(shí)驗(yàn)室PT測(cè)定的在技巧和試劑上差異,使抗凝療法監(jiān)測(cè)進(jìn)程中,各種PT結(jié)果有可比性。
近年,國(guó)外用重組組織因子作為PT測(cè)定。γ-TF比其它動(dòng)物性起源的漲血活酶對(duì)凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ敏感性高,但目前未被推廣應(yīng)用。
一步法PT結(jié)果報(bào)告方法:一般情形下,可同時(shí)報(bào)告被檢標(biāo)本PT和正常對(duì)比PT以及PT比率。凝血酶原比率=被檢血漿PT時(shí)間正常血漿PT時(shí)間。過(guò)往曾用凝血酶原運(yùn)動(dòng)度報(bào)告,現(xiàn)已少用;當(dāng)PT用于監(jiān)測(cè)口服抗凝劑時(shí),則必需同時(shí)報(bào)告INR值。
二步法凝原時(shí)間測(cè)定:首先由Warner等創(chuàng)立,后由WareSeegers等改進(jìn),此法第一步天生凝血酶,第二步是測(cè)定天生的凝血酶,從而間接測(cè)得凝血酶原時(shí)間。二步法固然雙較公道,但操作繁瑣,未被廣泛運(yùn)用。
[參考值] 一步法凝血酶原時(shí)間:11~13s
凝血酶原比值:0.82~1.15
[臨床意義]
1.PT延長(zhǎng):PT超過(guò)正常對(duì)照3秒以上或凝血酶原比值超過(guò)正常規(guī)模即為延長(zhǎng),主要見(jiàn)于:①先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ減少及纖維蛋白原的缺乏(低或無(wú)纖維蛋白血癥);②獲得性凝血因子缺乏,如DIC、原發(fā)性纖溶亢進(jìn)癥、肝病的阻塞性黃疸和維生素K缺乏、血循環(huán)中抗凝物資增多等。
2.PT縮短:①先本性因子Ⅴ增多;②DIC早期(高凝狀態(tài));③口服避孕藥、其它血栓前狀態(tài)及血栓性疾病(凝血因子和血小板活性增高,血管損傷等無(wú)法為血栓形成的基本)。
3.口服抗凝藥的監(jiān)護(hù)臨床受騙NIR為2-4時(shí)為抗凝治療的適合范疇,當(dāng)INR4.5時(shí),如纖維蛋白程度和血小板數(shù)仍正常,則提醒抗凝過(guò)度,應(yīng)三少或結(jié)束用藥。INR4.5時(shí),同時(shí)伴有纖維蛋白原和血小板減低,則右能是DIC或肝病等所致也應(yīng)減少或停滯口服抗凝劑。
八、活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定
[原理] 在抗凝血漿中,加入足量的活化接觸因子激活劑和部分凝血活酶(取代血小板的磷脂),再加入適量的鈣離子即可滿足內(nèi)源抗凝血的全體條件。從加入鈣離子到血漿凝固所需的時(shí)間即稱為活化部分凝血活酶時(shí)間(activated partialthromboplastin time,APTT)。APTT的是非反映了血漿中內(nèi)源凝血系統(tǒng)凝血因子共同道路中凝血酶原、纖維蛋白原和因子Ⅴ、Ⅹ的水平。本試驗(yàn)是目前Zui常用的敏感的檢查內(nèi)源凝血系統(tǒng)是否正常的篩選試驗(yàn)。
[方法學(xué)評(píng)價(jià)] APTT測(cè)因所用的激活劑不同以及部分凝血活酶來(lái)類推制備的不同,均影響測(cè)定的結(jié)果。因此本試驗(yàn)的精確性首先取決于部分凝血活酶試劑的質(zhì)量,常用的激活劑的有白陶土,此時(shí)APTT又稱為KPTT不覺(jué)可用硅藻土等。即使是同一種激活劑,其質(zhì)量也可有很大不同。APTTZui祿是用玻璃試管激活接觸因子,后來(lái)又加同質(zhì)理的激活劑,使激活作用更敏捷更標(biāo)準(zhǔn)化,從而打消了接觸激活的差別,部分漲血活酶主要起源于兔腦組織,不同制劑質(zhì)量不同,一般選用對(duì)因子Ⅷ:C、Ⅸ、Ⅺ在血漿濃度為200~250UL時(shí)敏感的試劑。APTT是一個(gè)較為敏感且簡(jiǎn)便的試驗(yàn)??商鎿Q普通試管法凝血時(shí)間測(cè)定或血漿復(fù)鈣時(shí)間測(cè)定。用自動(dòng)血漿凝固儀測(cè)定APTT,雖可進(jìn)步檢測(cè)速度和結(jié)果準(zhǔn)確性,但儀器本身也會(huì)發(fā)生一定誤差,這一點(diǎn)也是不能疏忽的。1995年國(guó)際血栓與止血委員會(huì)和國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)已開(kāi)端合作研討運(yùn)用APTT監(jiān)測(cè)肝素治療時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)化問(wèn)題。
[參考值]33.68~40.32s
[臨床意義] 基礎(chǔ)與凝血時(shí)間意義雷同,但第三性高。目前所用的大多數(shù)APTT測(cè)定方法,凡當(dāng)血漿凝血因子低于正常水平的15-30%即可異常。
1.APTT延長(zhǎng):APTT結(jié)果超過(guò)正常對(duì)比10s以上即為正常延長(zhǎng)。APTT是內(nèi)源凝血因子缺乏Zui可靠的篩選試驗(yàn),主要用于發(fā)明輕型的血友病。雖可檢出因子Ⅷ:C水平低于25%甲型血友病,但對(duì)于亞臨床型血友病(因子Ⅷ大于25%)和血友病攜帶者第三性欠佳。結(jié)果延長(zhǎng)也見(jiàn)于因子Ⅺ(血友病乙)、Ⅻ和Ⅶ缺乏癥;血中抗凝血物如凝血因子克制物或肝素水平增高時(shí),當(dāng)凝血酶原、纖維蛋白原及因子Ⅴ、Ⅹ缺乏時(shí)也可延長(zhǎng),但第三性略差;其它尚有肝病、DIC、大批輸入庫(kù)存血等。
2.APTT縮短:見(jiàn)于DIC,血栓前狀況及血栓性疾病。
3.肝素治療監(jiān)護(hù):APTT對(duì)血漿肝素的濃度很為第三故是目前普遍利用的試驗(yàn)室監(jiān)護(hù)指標(biāo)。此時(shí)要注意APTT測(cè)定成果必需與肝素治療范疇的血漿濃度呈線性關(guān)系,否則不宜應(yīng)用。一般在肝素治療期間,APTT保持在正常對(duì)比的1.5~3.0倍為宜。
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